中国兽医科技
中國獸醫科技
중국수의과기
CHINESE JOURNAL OF VETERINARY SCIENCE AND TECHNOLOGY
2004年
8期
22-26
,共5页
覃宗华%蔡建平%谢明权%艾哈迈德%彭新宇%魏文康%吴惠贤
覃宗華%蔡建平%謝明權%艾哈邁德%彭新宇%魏文康%吳惠賢
담종화%채건평%사명권%애합매덕%팽신우%위문강%오혜현
艾美球虫%大肠埃希氏菌%表达
艾美毬蟲%大腸埃希氏菌%錶達
애미구충%대장애희씨균%표체
根据已克隆的堆型艾美球虫(Eimeria acervulina)广东株子孢子表面抗原基因cSZ1的cDNA序列设计了特异性引物,用PCR方法扩增cSZ1的开放阅读框架(ORF)后克隆至表达载体pET-32a(+),构建了重组表达质粒pET-32a(+)-cSZ1,并将其转化至大肠埃希氏菌BL21(DE3).经IPTG诱导,获得了cSZ1重组抗原在大肠埃希氏菌中的高效表达,表达产物量可达菌体总蛋白的9.3%,融合蛋白的分子质量约为40ku.重组菌诱导表达的产物经SDS-PAGE后,用堆形艾美球虫感染鸡的超免疫血清进行免疫印迹分析,结果为阴性,提示cSZ1所编码的抗原可能主要是T细胞抗原表位.
根據已剋隆的堆型艾美毬蟲(Eimeria acervulina)廣東株子孢子錶麵抗原基因cSZ1的cDNA序列設計瞭特異性引物,用PCR方法擴增cSZ1的開放閱讀框架(ORF)後剋隆至錶達載體pET-32a(+),構建瞭重組錶達質粒pET-32a(+)-cSZ1,併將其轉化至大腸埃希氏菌BL21(DE3).經IPTG誘導,穫得瞭cSZ1重組抗原在大腸埃希氏菌中的高效錶達,錶達產物量可達菌體總蛋白的9.3%,融閤蛋白的分子質量約為40ku.重組菌誘導錶達的產物經SDS-PAGE後,用堆形艾美毬蟲感染鷄的超免疫血清進行免疫印跡分析,結果為陰性,提示cSZ1所編碼的抗原可能主要是T細胞抗原錶位.
근거이극륭적퇴형애미구충(Eimeria acervulina)엄동주자포자표면항원기인cSZ1적cDNA서렬설계료특이성인물,용PCR방법확증cSZ1적개방열독광가(ORF)후극륭지표체재체pET-32a(+),구건료중조표체질립pET-32a(+)-cSZ1,병장기전화지대장애희씨균BL21(DE3).경IPTG유도,획득료cSZ1중조항원재대장애희씨균중적고효표체,표체산물량가체균체총단백적9.3%,융합단백적분자질량약위40ku.중조균유도표체적산물경SDS-PAGE후,용퇴형애미구충감염계적초면역혈청진행면역인적분석,결과위음성,제시cSZ1소편마적항원가능주요시T세포항원표위.
