第二军医大学学报
第二軍醫大學學報
제이군의대학학보
ACADEMIC JOURNAL OF SECOND MILITARY MEDICAL UNIVERSITY
2005年
7期
779-782
,共4页
温宏升%王健民%齐海燕%周红%李津英%夏荣%邱慧颖
溫宏升%王健民%齊海燕%週紅%李津英%夏榮%邱慧穎
온굉승%왕건민%제해연%주홍%리진영%하영%구혜영
骨髓移植%T淋巴细胞%增强型绿色荧光蛋白%PKH26
骨髓移植%T淋巴細胞%增彊型綠色熒光蛋白%PKH26
골수이식%T림파세포%증강형록색형광단백%PKH26
目的:观察异基因骨髓移植中,供体T淋巴细胞在受体各器官(包括肝、肠、皮肤、肺、肾、脑和心肌等)中的分布情况,以及与同基因移植的异同.方法:以尼龙毛法从转增强型绿色荧光蛋白(eGFP)基因C57BL/6小鼠和C57BL/6小鼠脾细胞中分离T淋巴细胞,以红色荧光细胞膜染料PKH26(10μmol/ml)染色C57BL/6小鼠T淋巴细胞,将eGFP+T淋巴细胞或PKH26+T淋巴细胞与C57BL/6小鼠骨髓细胞一起经尾静脉分别输入经8.0 Gy全身照射的同基因受体小鼠(C57BL/6)和异基因受体小鼠(BALB/c)体内,建立小鼠同基因、异基因骨髓移植模型.在移植后第1天、第4天、第8天处死小鼠,观察肝、肠、皮肤、肺、肾、心、脑等组织冰冻切片中荧光细胞的分布.结果:异基因骨髓移植模型中,移植后第1天,受体小鼠各器官中未见绿色或红色荧光细胞;移植后第4天、第8天可见绿色或红色荧光细胞,主要分布于肝、肠、皮肤、肺,而肾、心、脑等组织中未见;移植后第8天肝、肠、皮肤、肺中eGFP+T淋巴细胞明显多于第4天;而移植后第8天肝、肠、皮肤、肺中PKH26+T淋巴细胞明显少于第4天(细胞膜上PKH26因细胞分裂而逐渐减少).同基因骨髓移植模型中,移植后第1天、第4天和第8天,肝、肠、皮肤、肺、肾、心、脑组织中均未见红色或绿色荧光细胞.结论:异基因骨髓移植中,可能因供体T淋巴细胞被激活、增殖,故可大量进入受体肝、肠、皮肤、肺等器官;肝、肠、皮肤是公认的移植物抗宿主病(GVHD)靶器官,肺可能也是潜在的GVHD靶器官.同基因骨髓移植中,可能因供体T淋巴细胞不能被激活、增殖,因而不能大量进入受体肝、肠、皮肤、肺等器官.
目的:觀察異基因骨髓移植中,供體T淋巴細胞在受體各器官(包括肝、腸、皮膚、肺、腎、腦和心肌等)中的分佈情況,以及與同基因移植的異同.方法:以尼龍毛法從轉增彊型綠色熒光蛋白(eGFP)基因C57BL/6小鼠和C57BL/6小鼠脾細胞中分離T淋巴細胞,以紅色熒光細胞膜染料PKH26(10μmol/ml)染色C57BL/6小鼠T淋巴細胞,將eGFP+T淋巴細胞或PKH26+T淋巴細胞與C57BL/6小鼠骨髓細胞一起經尾靜脈分彆輸入經8.0 Gy全身照射的同基因受體小鼠(C57BL/6)和異基因受體小鼠(BALB/c)體內,建立小鼠同基因、異基因骨髓移植模型.在移植後第1天、第4天、第8天處死小鼠,觀察肝、腸、皮膚、肺、腎、心、腦等組織冰凍切片中熒光細胞的分佈.結果:異基因骨髓移植模型中,移植後第1天,受體小鼠各器官中未見綠色或紅色熒光細胞;移植後第4天、第8天可見綠色或紅色熒光細胞,主要分佈于肝、腸、皮膚、肺,而腎、心、腦等組織中未見;移植後第8天肝、腸、皮膚、肺中eGFP+T淋巴細胞明顯多于第4天;而移植後第8天肝、腸、皮膚、肺中PKH26+T淋巴細胞明顯少于第4天(細胞膜上PKH26因細胞分裂而逐漸減少).同基因骨髓移植模型中,移植後第1天、第4天和第8天,肝、腸、皮膚、肺、腎、心、腦組織中均未見紅色或綠色熒光細胞.結論:異基因骨髓移植中,可能因供體T淋巴細胞被激活、增殖,故可大量進入受體肝、腸、皮膚、肺等器官;肝、腸、皮膚是公認的移植物抗宿主病(GVHD)靶器官,肺可能也是潛在的GVHD靶器官.同基因骨髓移植中,可能因供體T淋巴細胞不能被激活、增殖,因而不能大量進入受體肝、腸、皮膚、肺等器官.
목적:관찰이기인골수이식중,공체T림파세포재수체각기관(포괄간、장、피부、폐、신、뇌화심기등)중적분포정황,이급여동기인이식적이동.방법:이니룡모법종전증강형록색형광단백(eGFP)기인C57BL/6소서화C57BL/6소서비세포중분리T림파세포,이홍색형광세포막염료PKH26(10μmol/ml)염색C57BL/6소서T림파세포,장eGFP+T림파세포혹PKH26+T림파세포여C57BL/6소서골수세포일기경미정맥분별수입경8.0 Gy전신조사적동기인수체소서(C57BL/6)화이기인수체소서(BALB/c)체내,건립소서동기인、이기인골수이식모형.재이식후제1천、제4천、제8천처사소서,관찰간、장、피부、폐、신、심、뇌등조직빙동절편중형광세포적분포.결과:이기인골수이식모형중,이식후제1천,수체소서각기관중미견록색혹홍색형광세포;이식후제4천、제8천가견록색혹홍색형광세포,주요분포우간、장、피부、폐,이신、심、뇌등조직중미견;이식후제8천간、장、피부、폐중eGFP+T림파세포명현다우제4천;이이식후제8천간、장、피부、폐중PKH26+T림파세포명현소우제4천(세포막상PKH26인세포분렬이축점감소).동기인골수이식모형중,이식후제1천、제4천화제8천,간、장、피부、폐、신、심、뇌조직중균미견홍색혹록색형광세포.결론:이기인골수이식중,가능인공체T림파세포피격활、증식,고가대량진입수체간、장、피부、폐등기관;간、장、피부시공인적이식물항숙주병(GVHD)파기관,폐가능야시잠재적GVHD파기관.동기인골수이식중,가능인공체T림파세포불능피격활、증식,인이불능대량진입수체간、장、피부、폐등기관.