CAJ | 학술논문

目的研制N-乙酰化酶2(NAT2)基因分型芯片,以快速、准确检测患者的NAT2单核苷酸基因多态性.方法设计并合成中国人中常见的NAT2酶基因5个突变位点的探针对和包含5个突变位点的两对引物;样本经PCR扩增后,采用丙烯酰胺点样液制备芯片,并与TEMED反应固化芯片;分别用探针与芯片杂交,采用博奥晶芯LUXSCAN 10K微阵列芯片扫描仪分析结果.结果优化了PCR扩增条件,使两组PCR在相同条件下扩增;优化了芯片制备及杂交条件,双链DNA采用碱变性,清除非特异键合采用电泳方法;建立了NAT2酶基因分型标准:信号强度Cy3:Cy5≥5为野生型,Cy3:Cy5为0.6～1.5时为杂合子,Cy3:Cy5≤0.2为突变型;对20例标本的基因分型结果采用直接测序法进行验证,结果均一致.结论三维凝胶NAT2基因点突变分型芯片法是一种特异性强、高通量的NAT2基因分型方法,适用于临床快速基因分型,指导相关药物合理使用.[KH
목적 연제N-을선화매2(NAT2)기인분형심편,이쾌속、준학검측환자적NAT2단핵감산기인다태성.방법 설계병합성중국인중상견적NAT2매기인5개돌변위점적탐침대화포함5개돌변위점적량대인물;양본경PCR확증후,채용병희선알점양액제비심편,병여TEMED반응고화심편;분별용탐침여심편잡교,채용박오정심LUXSCAN 10K미진렬심편소묘의분석결과.결과 우화료PCR확증조건,사량조PCR재상동조건하확증;우화료심편제비급잡교조건,쌍련DNA채용감변성,청제비특이건합채용전영방법;건립료NAT2매기인분형표준:신호강도Cy3:Cy5≥5위야생형,Cy3:Cy5위0.6～1.5시위잡합자,Cy3:Cy5≤0.2위돌변형;대20례표본적기인분형결과채용직접측서법진행험증,결과균일치.결론 삼유응효NAT2기인점돌변분형심편법시일충특이성강、고통량적NAT2기인분형방법,괄용우림상쾌속기인분형,지도상관약물합리사용.[KH