分子细胞生物学报
分子細胞生物學報
분자세포생물학보
JOURNAL OF MOLECULAR CELL BIOLOGY
2008年
2期
120-128
,共9页
10-羟基喜树碱%细胞核%细胞凋亡%c-ICAT%定量蛋白质组学
10-羥基喜樹堿%細胞覈%細胞凋亡%c-ICAT%定量蛋白質組學
10-간기희수감%세포핵%세포조망%c-ICAT%정량단백질조학
对羟基喜树碱诱导肝癌细胞凋亡前后的细胞核蛋白质组进行定量研究.获得凋亡前后细胞核蛋白质组中差异蛋白表达量相对变化的信息,为在亚细胞定量蛋白质组水平上深入探讨羟基喜树碱的作用机理提供实验依据.分离提取羟基喜树碱诱导肝癌细胞凋亡前后的细胞核并鉴定其纯度,用含稳定同位素的化学试剂c-ICAT标记细胞凋亡前后的细胞核蛋白.对细胞核标记蛋白进行消化和纯化,利用基于多维色谱-线性离子阱/静电场轨道阱质谱联用技术的鸟枪(Shotgun)法策略及c-ICAT定量策略分析鉴定蛋白质,获得同一种肝癌细胞核蛋白质在凋亡前后细胞中的表达量变化比值.分析鉴定了在细胞凋亡前后的表达量差异有显著统计学意义(P<0.05)的肝癌细胞核蛋白42个,其中,12个蛋白的表达量在羟基喜树碱诱导细胞凋亡后下调,30个蛋白的表达量在凋亡细胞中上调.这些差异蛋白的分子功能主要与细胞增殖、凋亡和分化、能量代谢、核酸代谢以及细胞骨架相关.
對羥基喜樹堿誘導肝癌細胞凋亡前後的細胞覈蛋白質組進行定量研究.穫得凋亡前後細胞覈蛋白質組中差異蛋白錶達量相對變化的信息,為在亞細胞定量蛋白質組水平上深入探討羥基喜樹堿的作用機理提供實驗依據.分離提取羥基喜樹堿誘導肝癌細胞凋亡前後的細胞覈併鑒定其純度,用含穩定同位素的化學試劑c-ICAT標記細胞凋亡前後的細胞覈蛋白.對細胞覈標記蛋白進行消化和純化,利用基于多維色譜-線性離子阱/靜電場軌道阱質譜聯用技術的鳥鎗(Shotgun)法策略及c-ICAT定量策略分析鑒定蛋白質,穫得同一種肝癌細胞覈蛋白質在凋亡前後細胞中的錶達量變化比值.分析鑒定瞭在細胞凋亡前後的錶達量差異有顯著統計學意義(P<0.05)的肝癌細胞覈蛋白42箇,其中,12箇蛋白的錶達量在羥基喜樹堿誘導細胞凋亡後下調,30箇蛋白的錶達量在凋亡細胞中上調.這些差異蛋白的分子功能主要與細胞增殖、凋亡和分化、能量代謝、覈痠代謝以及細胞骨架相關.
대간기희수감유도간암세포조망전후적세포핵단백질조진행정량연구.획득조망전후세포핵단백질조중차이단백표체량상대변화적신식,위재아세포정량단백질조수평상심입탐토간기희수감적작용궤리제공실험의거.분리제취간기희수감유도간암세포조망전후적세포핵병감정기순도,용함은정동위소적화학시제c-ICAT표기세포조망전후적세포핵단백.대세포핵표기단백진행소화화순화,이용기우다유색보-선성리자정/정전장궤도정질보련용기술적조창(Shotgun)법책략급c-ICAT정량책략분석감정단백질,획득동일충간암세포핵단백질재조망전후세포중적표체량변화비치.분석감정료재세포조망전후적표체량차이유현저통계학의의(P<0.05)적간암세포핵단백42개,기중,12개단백적표체량재간기희수감유도세포조망후하조,30개단백적표체량재조망세포중상조.저사차이단백적분자공능주요여세포증식、조망화분화、능량대사、핵산대사이급세포골가상관.
