畜牧与兽医
畜牧與獸醫
축목여수의
ANIMAL HUSBANDRY & VETERINARY MEDICINE
2007年
4期
1-4
,共4页
马苏%李玉峰%段舒怡%姜平
馬囌%李玉峰%段舒怡%薑平
마소%리옥봉%단서이%강평
猪繁殖与呼吸综合征病毒%N蛋白%单克隆抗体
豬繁殖與呼吸綜閤徵病毒%N蛋白%單剋隆抗體
저번식여호흡종합정병독%N단백%단극륭항체
分别用纯化的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)和纯化的重组N蛋白免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备抗PRRSV N蛋白的单克隆抗体(McAb).用纯化的PRRSV病毒免疫小鼠,经细胞融合获得2株可分泌特异性单抗的杂交瘤细胞株,分别命名为4B8、4D8.用重组N蛋白免疫的小鼠,经细胞融合获得3株可分泌特异性McAb的抗PRRSV N蛋白的杂交瘤细胞2F3、4D5、5D11.间接ELISA检测4D8、4B8、4D5和5D11杂交瘤上清效价为1∶32～1∶512,而2F3的腹水效价为1∶12 800.单抗2F3、4B8和4D8与纯化病毒的Western blotting反应都为阳性,而4D5和5D11为阴性.IFA检测结果5株单抗都有明显的荧光,与PRRSV呈阳性反应.2F3的Ig亚型为IgM.5株单抗杂交瘤细胞连续传代至20代,分泌相应McAb的效价基本一致.本研究为PRRSV生物学诊断和方法研究提供有用工具.
分彆用純化的豬繁殖與呼吸綜閤徵病毒(PRRSV)和純化的重組N蛋白免疫BALB/c小鼠,採用雜交瘤技術製備抗PRRSV N蛋白的單剋隆抗體(McAb).用純化的PRRSV病毒免疫小鼠,經細胞融閤穫得2株可分泌特異性單抗的雜交瘤細胞株,分彆命名為4B8、4D8.用重組N蛋白免疫的小鼠,經細胞融閤穫得3株可分泌特異性McAb的抗PRRSV N蛋白的雜交瘤細胞2F3、4D5、5D11.間接ELISA檢測4D8、4B8、4D5和5D11雜交瘤上清效價為1∶32～1∶512,而2F3的腹水效價為1∶12 800.單抗2F3、4B8和4D8與純化病毒的Western blotting反應都為暘性,而4D5和5D11為陰性.IFA檢測結果5株單抗都有明顯的熒光,與PRRSV呈暘性反應.2F3的Ig亞型為IgM.5株單抗雜交瘤細胞連續傳代至20代,分泌相應McAb的效價基本一緻.本研究為PRRSV生物學診斷和方法研究提供有用工具.
분별용순화적저번식여호흡종합정병독(PRRSV)화순화적중조N단백면역BALB/c소서,채용잡교류기술제비항PRRSV N단백적단극륭항체(McAb).용순화적PRRSV병독면역소서,경세포융합획득2주가분비특이성단항적잡교류세포주,분별명명위4B8、4D8.용중조N단백면역적소서,경세포융합획득3주가분비특이성McAb적항PRRSV N단백적잡교류세포2F3、4D5、5D11.간접ELISA검측4D8、4B8、4D5화5D11잡교류상청효개위1∶32～1∶512,이2F3적복수효개위1∶12 800.단항2F3、4B8화4D8여순화병독적Western blotting반응도위양성,이4D5화5D11위음성.IFA검측결과5주단항도유명현적형광,여PRRSV정양성반응.2F3적Ig아형위IgM.5주단항잡교류세포련속전대지20대,분비상응McAb적효개기본일치.본연구위PRRSV생물학진단화방법연구제공유용공구.
