昆虫学报
昆蟲學報
곤충학보
ACTA ENTOMOLOGICA SINICA
2008年
7期
694-699
,共6页
李素丽%张富春%孙琳杰%刘璇%马纪
李素麗%張富春%孫琳傑%劉璇%馬紀
리소려%장부춘%손림걸%류선%마기
准噶尔小胸鳖甲%抗冻蛋白%原核表达%热滞活性%冰晶形态
準噶爾小胸鱉甲%抗凍蛋白%原覈錶達%熱滯活性%冰晶形態
준갈이소흉별갑%항동단백%원핵표체%열체활성%빙정형태
为了比较准噶尔小胸鳖甲Microdera punctipennis dzhungarica原核表达的不同融合抗冻蛋白活性是否存在差异,分别利用重组表达质粒pGEX-4T-1-Mpafp5和pMAL-p2x-Mpafp5在大肠杆菌Escherichia coli BL21(DE3)中诱导表达融合抗冻蛋白GST-MpAFP5和MBP-MpAFP5,并利用亲和层析纯化蛋白.SDS-PAGE分析结果证明获得了两种高效表达纯化的GST-MpAFP5和MBP-MpAFP5融合蛋白.在浓度为0.5 mg/mL时,两种蛋白的热滞值分别为0.51℃和1.336℃,其溶液冰晶形态均为棱型.抗冻保护实验结果显示:准噶尔小胸鳖甲两种融合抗冻蛋白均能够显著提高细菌在低温下的存活率,并且MBP-MpAFP5对细菌的保护效果显著高于GST-MpAFP5.研究结果对于准噶尔小胸鳖甲抗冻蛋白的应用具有重要的理论意义.
為瞭比較準噶爾小胸鱉甲Microdera punctipennis dzhungarica原覈錶達的不同融閤抗凍蛋白活性是否存在差異,分彆利用重組錶達質粒pGEX-4T-1-Mpafp5和pMAL-p2x-Mpafp5在大腸桿菌Escherichia coli BL21(DE3)中誘導錶達融閤抗凍蛋白GST-MpAFP5和MBP-MpAFP5,併利用親和層析純化蛋白.SDS-PAGE分析結果證明穫得瞭兩種高效錶達純化的GST-MpAFP5和MBP-MpAFP5融閤蛋白.在濃度為0.5 mg/mL時,兩種蛋白的熱滯值分彆為0.51℃和1.336℃,其溶液冰晶形態均為稜型.抗凍保護實驗結果顯示:準噶爾小胸鱉甲兩種融閤抗凍蛋白均能夠顯著提高細菌在低溫下的存活率,併且MBP-MpAFP5對細菌的保護效果顯著高于GST-MpAFP5.研究結果對于準噶爾小胸鱉甲抗凍蛋白的應用具有重要的理論意義.
위료비교준갈이소흉별갑Microdera punctipennis dzhungarica원핵표체적불동융합항동단백활성시부존재차이,분별이용중조표체질립pGEX-4T-1-Mpafp5화pMAL-p2x-Mpafp5재대장간균Escherichia coli BL21(DE3)중유도표체융합항동단백GST-MpAFP5화MBP-MpAFP5,병이용친화층석순화단백.SDS-PAGE분석결과증명획득료량충고효표체순화적GST-MpAFP5화MBP-MpAFP5융합단백.재농도위0.5 mg/mL시,량충단백적열체치분별위0.51℃화1.336℃,기용액빙정형태균위릉형.항동보호실험결과현시:준갈이소흉별갑량충융합항동단백균능구현저제고세균재저온하적존활솔,병차MBP-MpAFP5대세균적보호효과현저고우GST-MpAFP5.연구결과대우준갈이소흉별갑항동단백적응용구유중요적이론의의.
