激光生物学报
激光生物學報
격광생물학보
ACTA LASER BIOLOGY SINICA
2009年
4期
550-555
,共6页
唐华容%谭倩%陈方平%谭三勤%张帆%柳林欣
唐華容%譚倩%陳方平%譚三勤%張帆%柳林訢
당화용%담천%진방평%담삼근%장범%류림흔
染色质免疫共沉淀(ChIP)%微小染色质免疫共沉淀(miniChIP)%组蛋白H4乙酰化%MEL细胞
染色質免疫共沉澱(ChIP)%微小染色質免疫共沉澱(miniChIP)%組蛋白H4乙酰化%MEL細胞
염색질면역공침정(ChIP)%미소염색질면역공침정(miniChIP)%조단백H4을선화%MEL세포
染色质免疫共沉淀(chromatin immunoprecipitation assay,ChIP)是目前研究蛋白与DNA相互作用的强有力的技术之一.然而传统的ChIP实验方法的最大缺陷是要求大量的细胞数,这限制了它应用于少量细胞数的样品.在传统ChIP实验的基础上综合国外文献建立了一种能在少量细胞样品中进行的染色质免疫共沉淀实验,称之为微小染色质免疫共沉淀(miniChIP).并通过对诱导前后的MEL细胞中表达的β珠蛋白基因簇组蛋白H4乙酰化(acH4)的研究,证实了其可靠性和特异性.结果显示:高敏位点HS2和活跃基因β-maj的启动子区域存在一定的组蛋白H4乙酰化水平,DMSO诱导后显著增加,而不活跃基因Ey的启动子区域则检测到极低水平的组蛋白H4乙酰化,且诱导后无明显变化.
染色質免疫共沉澱(chromatin immunoprecipitation assay,ChIP)是目前研究蛋白與DNA相互作用的彊有力的技術之一.然而傳統的ChIP實驗方法的最大缺陷是要求大量的細胞數,這限製瞭它應用于少量細胞數的樣品.在傳統ChIP實驗的基礎上綜閤國外文獻建立瞭一種能在少量細胞樣品中進行的染色質免疫共沉澱實驗,稱之為微小染色質免疫共沉澱(miniChIP).併通過對誘導前後的MEL細胞中錶達的β珠蛋白基因簇組蛋白H4乙酰化(acH4)的研究,證實瞭其可靠性和特異性.結果顯示:高敏位點HS2和活躍基因β-maj的啟動子區域存在一定的組蛋白H4乙酰化水平,DMSO誘導後顯著增加,而不活躍基因Ey的啟動子區域則檢測到極低水平的組蛋白H4乙酰化,且誘導後無明顯變化.
염색질면역공침정(chromatin immunoprecipitation assay,ChIP)시목전연구단백여DNA상호작용적강유력적기술지일.연이전통적ChIP실험방법적최대결함시요구대량적세포수,저한제료타응용우소량세포수적양품.재전통ChIP실험적기출상종합국외문헌건립료일충능재소량세포양품중진행적염색질면역공침정실험,칭지위미소염색질면역공침정(miniChIP).병통과대유도전후적MEL세포중표체적β주단백기인족조단백H4을선화(acH4)적연구,증실료기가고성화특이성.결과현시:고민위점HS2화활약기인β-maj적계동자구역존재일정적조단백H4을선화수평,DMSO유도후현저증가,이불활약기인Ey적계동자구역칙검측도겁저수평적조단백H4을선화,차유도후무명현변화.
