畜牧与兽医
畜牧與獸醫
축목여수의
ANIMAL HUSBANDRY & VETERINARY MEDICINE
2010年
4期
28-32
,共5页
吴诗敏%陈芳艳%陈瑞爱%刘颖%王林川
吳詩敏%陳芳豔%陳瑞愛%劉穎%王林川
오시민%진방염%진서애%류영%왕림천
副猪嗜血杆菌%LAMP%核酸检测
副豬嗜血桿菌%LAMP%覈痠檢測
부저기혈간균%LAMP%핵산검측
采用环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)建立了一种快速、灵敏、高度特异的副猪嗜血杆菌(Hps)检测方法.针对Hps 16S rRNA基因保守区域设计6条引物,在Bst大片段聚合酶的作用下,对模板DNA进行梯状等温扩增,并且优化LAMP的反应体系,检验其灵敏性与特异性.结果表明:该方法对Hps的最小检测限为0.2 pg/μL,灵敏性高于常规PCR方法103倍;完成反应仅需65 min.该方法灵敏度高、特异性好,能够作为Hps的快速诊断方法,对于基层和实验室应用均具有良好前景.
採用環介導等溫擴增技術(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)建立瞭一種快速、靈敏、高度特異的副豬嗜血桿菌(Hps)檢測方法.針對Hps 16S rRNA基因保守區域設計6條引物,在Bst大片段聚閤酶的作用下,對模闆DNA進行梯狀等溫擴增,併且優化LAMP的反應體繫,檢驗其靈敏性與特異性.結果錶明:該方法對Hps的最小檢測限為0.2 pg/μL,靈敏性高于常規PCR方法103倍;完成反應僅需65 min.該方法靈敏度高、特異性好,能夠作為Hps的快速診斷方法,對于基層和實驗室應用均具有良好前景.
채용배개도등온확증기술(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)건립료일충쾌속、령민、고도특이적부저기혈간균(Hps)검측방법.침대Hps 16S rRNA기인보수구역설계6조인물,재Bst대편단취합매적작용하,대모판DNA진행제상등온확증,병차우화LAMP적반응체계,검험기령민성여특이성.결과표명:해방법대Hps적최소검측한위0.2 pg/μL,령민성고우상규PCR방법103배;완성반응부수65 min.해방법령민도고、특이성호,능구작위Hps적쾌속진단방법,대우기층화실험실응용균구유량호전경.
