CAJ | 학술논문

目的:应用流式细胞术测定胞内细胞因子,检测不同T淋巴细胞亚群和其他淋巴细胞亚群中白介素-9(IL-9)产生细胞的比例.方法:23名健康成年人外周抗凝血加等量1640培养液后,加佛波酯、离子霉素及莫能霉素培养6 h.收集细胞后,先用不同荧光素标记的抗人CD3、抗人CD8和抗人T细胞抗原受体γδ(TCRγδ)单抗,或抗人CD19和抗CD56单抗作细胞表面染色,再经过溶血,固定和透膜处理后,加抗胞内细胞因子的抗IL-9和IL-17的荧光抗体作胞内染色,用流式细胞仪检测和分析IL-9产生细胞在不同T淋巴细胞亚群和其他淋巴细胞亚群中的分布频率.结果:IL-9产生细胞在总T细胞(CD3+T)、CD4+T细胞、CD8+T细胞和γδT细胞中的百分比分别为0.35±0.31、0.22±0.13、0.31±0.29和1.07±1.05.γδT细胞中的IL-9产生细胞明显高于其他淋巴细胞亚群(P＜0.01).同时也发现自然杀伤细胞(NK细胞)中也有少量IL-9产生细胞.另外还发现,共表达IL-9和IL-17的细胞在CD3+T及其亚群CD4+T和CD8+T细胞中的比例很低(0.03%～0.06%),但在γδT细胞中的比例可达(0.28±0.34)%,差异有统计学意义(P＜0.01).结论:用流式细胞术测定单细胞水平胞内细胞因子的技术发现,不仅CD4+T细胞中,而且CD8+T细胞和γδT细胞以及NK细胞中均存在产生IL-9的细胞.
목적:응용류식세포술측정포내세포인자,검측불동T림파세포아군화기타림파세포아군중백개소-9(IL-9)산생세포적비례.방법:23명건강성년인외주항응혈가등량1640배양액후,가불파지、리자매소급막능매소배양6 h.수집세포후,선용불동형광소표기적항인CD3、항인CD8화항인T세포항원수체γδ(TCRγδ)단항,혹항인CD19화항CD56단항작세포표면염색,재경과용혈,고정화투막처리후,가항포내세포인자적항IL-9화IL-17적형광항체작포내염색,용류식세포의검측화분석IL-9산생세포재불동T림파세포아군화기타림파세포아군중적분포빈솔.결과:IL-9산생세포재총T세포(CD3+T)、CD4+T세포、CD8+T세포화γδT세포중적백분비분별위0.35±0.31、0.22±0.13、0.31±0.29화1.07±1.05.γδT세포중적IL-9산생세포명현고우기타림파세포아군(P＜0.01).동시야발현자연살상세포(NK세포)중야유소량IL-9산생세포.령외환발현,공표체IL-9화IL-17적세포재CD3+T급기아군CD4+T화CD8+T세포중적비례흔저(0.03%～0.06%),단재γδT세포중적비례가체(0.28±0.34)%,차이유통계학의의(P＜0.01).결론:용류식세포술측정단세포수평포내세포인자적기술발현,불부CD4+T세포중,이차CD8+T세포화γδT세포이급NK세포중균존재산생IL-9적세포.