重庆医学
重慶醫學
중경의학
CHONGQING MEDICAL JOURNAL
2012年
4期
355-356,359,361,封3
,共5页
齐莹莹%杜英%李倩如%陈惠萍%徐虹%周云%董子明
齊瑩瑩%杜英%李倩如%陳惠萍%徐虹%週雲%董子明
제형형%두영%리천여%진혜평%서홍%주운%동자명
树突状细胞%脐静脉内皮细胞%脐血单个核细胞
樹突狀細胞%臍靜脈內皮細胞%臍血單箇覈細胞
수돌상세포%제정맥내피세포%제혈단개핵세포
目的 探讨人脐静脉内皮细胞对人脐血单个核细胞(UBMCs)向树突状细胞(DC)分化的影响,建立更便捷、更经济体外培养DC的方法.方法 胶原酶消化分离出脐静脉内皮细胞(HUVEC),经鉴定和体外培养扩增后,使其平铺生长于Transwell板上室底部,将UBMCs接种到Transwell小室内,同时加入EC9706细胞冻融形成的蛋白质抗原,与HUVEC共培养,使UBMCs与HUVEC紧密接触并从Transwell板上室迁移到下室,收集Transwell板下室细胞,流式细胞术检测下室细胞DC相关表面标志CD80、CD40、CD83、CD1a和MHC分子;通过MTT法检测肿瘤负载的UBDC诱导CTL对靶细胞的特异性杀伤作用.结果 经HUVEC诱导并负载了肿瘤细胞抗原的DC CD80、CD40、CD83、CD1a和MHC-Ⅱ类分子表达增加,产生的细胞毒性T细胞(CTL)可特异性杀伤食管癌细胞EC9706;与细胞因子诱导DC活化的CTL对EC9706的杀伤率比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 利用Transwell小室以人原代脐静脉内皮细胞诱导脐血单个核细胞分化的DC是可行的一种实验方法.
目的 探討人臍靜脈內皮細胞對人臍血單箇覈細胞(UBMCs)嚮樹突狀細胞(DC)分化的影響,建立更便捷、更經濟體外培養DC的方法.方法 膠原酶消化分離齣臍靜脈內皮細胞(HUVEC),經鑒定和體外培養擴增後,使其平鋪生長于Transwell闆上室底部,將UBMCs接種到Transwell小室內,同時加入EC9706細胞凍融形成的蛋白質抗原,與HUVEC共培養,使UBMCs與HUVEC緊密接觸併從Transwell闆上室遷移到下室,收集Transwell闆下室細胞,流式細胞術檢測下室細胞DC相關錶麵標誌CD80、CD40、CD83、CD1a和MHC分子;通過MTT法檢測腫瘤負載的UBDC誘導CTL對靶細胞的特異性殺傷作用.結果 經HUVEC誘導併負載瞭腫瘤細胞抗原的DC CD80、CD40、CD83、CD1a和MHC-Ⅱ類分子錶達增加,產生的細胞毒性T細胞(CTL)可特異性殺傷食管癌細胞EC9706;與細胞因子誘導DC活化的CTL對EC9706的殺傷率比較差異無統計學意義(P>0.05).結論 利用Transwell小室以人原代臍靜脈內皮細胞誘導臍血單箇覈細胞分化的DC是可行的一種實驗方法.
목적 탐토인제정맥내피세포대인제혈단개핵세포(UBMCs)향수돌상세포(DC)분화적영향,건립경편첩、경경제체외배양DC적방법.방법 효원매소화분리출제정맥내피세포(HUVEC),경감정화체외배양확증후,사기평포생장우Transwell판상실저부,장UBMCs접충도Transwell소실내,동시가입EC9706세포동융형성적단백질항원,여HUVEC공배양,사UBMCs여HUVEC긴밀접촉병종Transwell판상실천이도하실,수집Transwell판하실세포,류식세포술검측하실세포DC상관표면표지CD80、CD40、CD83、CD1a화MHC분자;통과MTT법검측종류부재적UBDC유도CTL대파세포적특이성살상작용.결과 경HUVEC유도병부재료종류세포항원적DC CD80、CD40、CD83、CD1a화MHC-Ⅱ류분자표체증가,산생적세포독성T세포(CTL)가특이성살상식관암세포EC9706;여세포인자유도DC활화적CTL대EC9706적살상솔비교차이무통계학의의(P>0.05).결론 이용Transwell소실이인원대제정맥내피세포유도제혈단개핵세포분화적DC시가행적일충실험방법.
