中国组织工程研究
中國組織工程研究
중국조직공정연구
Journal of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research
2012年
24期
4408-4412
,共5页
转化生长因子β3%腺病毒%转染%髓核细胞%椎间盘退变
轉化生長因子β3%腺病毒%轉染%髓覈細胞%椎間盤退變
전화생장인자β3%선병독%전염%수핵세포%추간반퇴변
背景:通过基因干扰促进某些基因的表达,调控细胞生物学活性刺激有利于椎间盘组织再生的基质合成来达到治疗目的.目的:构建含有转化生长因子β3的腺病毒表达载体,观察其对退变髓核细胞增殖的影响.方法:制作椎间盘突变模型,从而获取原代退变椎间盘髓核细胞,提取总RNA,调取转化生长因子β3cDNA克隆至穿梭质粒pAdTrack-CMV,采用pAdEasy系统进行细菌内同源重组得到含目的基因的腺病毒载体,脂质体转染293A细胞进行包装并扩增病毒.结果与结论:成功构建有较强感染能力的含转化生长因子β3基因重组腺病毒表达载体,滴度达1010 pfu/L,MTT法检测表明Ad-TGF-β3可改善退变髓核细胞生物学特性,为研究转化生长因子β3的作用机制及将其用于椎间盘退变的基因治疗提供实验和理论依据.
揹景:通過基因榦擾促進某些基因的錶達,調控細胞生物學活性刺激有利于椎間盤組織再生的基質閤成來達到治療目的.目的:構建含有轉化生長因子β3的腺病毒錶達載體,觀察其對退變髓覈細胞增殖的影響.方法:製作椎間盤突變模型,從而穫取原代退變椎間盤髓覈細胞,提取總RNA,調取轉化生長因子β3cDNA剋隆至穿梭質粒pAdTrack-CMV,採用pAdEasy繫統進行細菌內同源重組得到含目的基因的腺病毒載體,脂質體轉染293A細胞進行包裝併擴增病毒.結果與結論:成功構建有較彊感染能力的含轉化生長因子β3基因重組腺病毒錶達載體,滴度達1010 pfu/L,MTT法檢測錶明Ad-TGF-β3可改善退變髓覈細胞生物學特性,為研究轉化生長因子β3的作用機製及將其用于椎間盤退變的基因治療提供實驗和理論依據.
배경:통과기인간우촉진모사기인적표체,조공세포생물학활성자격유리우추간반조직재생적기질합성래체도치료목적.목적:구건함유전화생장인자β3적선병독표체재체,관찰기대퇴변수핵세포증식적영향.방법:제작추간반돌변모형,종이획취원대퇴변추간반수핵세포,제취총RNA,조취전화생장인자β3cDNA극륭지천사질립pAdTrack-CMV,채용pAdEasy계통진행세균내동원중조득도함목적기인적선병독재체,지질체전염293A세포진행포장병확증병독.결과여결론:성공구건유교강감염능력적함전화생장인자β3기인중조선병독표체재체,적도체1010 pfu/L,MTT법검측표명Ad-TGF-β3가개선퇴변수핵세포생물학특성,위연구전화생장인자β3적작용궤제급장기용우추간반퇴변적기인치료제공실험화이론의거.