中国畜牧兽医
中國畜牧獸醫
중국축목수의
CHINA ANIMAL HUSBANDRY & VETERINARY MEDICINE
2012年
9期
59-62
,共4页
卢田粉%柴同杰%孙玲玉%李欣贤%郝海玉%吕长辉%杨延伟
盧田粉%柴同傑%孫玲玉%李訢賢%郝海玉%呂長輝%楊延偉
로전분%시동걸%손령옥%리흔현%학해옥%려장휘%양연위
产气荚膜梭菌%ε毒素%表达%免疫保护性
產氣莢膜梭菌%ε毒素%錶達%免疫保護性
산기협막사균%ε독소%표체%면역보호성
ε毒素是由B和D型产气荚膜梭菌产生的,能够引起牛、羊肠毒血症,给畜牧业造成巨大的经济损失.本试验将ε毒素基因片段(972 bp)以正确的阅读框架定向连接到pET-28a(+)质粒上,然后将重组质粒导入受体菌株,成功构建重组菌株BL21(DE3).SDS-PAGE和Western blotting检测结果表明,重组的菌株BL21 (DE3)能以包涵体的形式高效表达ε毒素(占菌体总蛋白的32.83％).在此基础上,用有效剂量0.2 mg包涵体粗提物免疫家兔,抗血清间接ELISA检测结果显示,在第4周抗体效价达到最高值为8.7log2.因此,在本研究中构建的重组菌株BL21(DE3)能高效表达ε毒素,而且该毒素具有较高的免疫保护性.
ε毒素是由B和D型產氣莢膜梭菌產生的,能夠引起牛、羊腸毒血癥,給畜牧業造成巨大的經濟損失.本試驗將ε毒素基因片段(972 bp)以正確的閱讀框架定嚮連接到pET-28a(+)質粒上,然後將重組質粒導入受體菌株,成功構建重組菌株BL21(DE3).SDS-PAGE和Western blotting檢測結果錶明,重組的菌株BL21 (DE3)能以包涵體的形式高效錶達ε毒素(佔菌體總蛋白的32.83％).在此基礎上,用有效劑量0.2 mg包涵體粗提物免疫傢兔,抗血清間接ELISA檢測結果顯示,在第4週抗體效價達到最高值為8.7log2.因此,在本研究中構建的重組菌株BL21(DE3)能高效錶達ε毒素,而且該毒素具有較高的免疫保護性.
ε독소시유B화D형산기협막사균산생적,능구인기우、양장독혈증,급축목업조성거대적경제손실.본시험장ε독소기인편단(972 bp)이정학적열독광가정향련접도pET-28a(+)질립상,연후장중조질립도입수체균주,성공구건중조균주BL21(DE3).SDS-PAGE화Western blotting검측결과표명,중조적균주BL21 (DE3)능이포함체적형식고효표체ε독소(점균체총단백적32.83％).재차기출상,용유효제량0.2 mg포함체조제물면역가토,항혈청간접ELISA검측결과현시,재제4주항체효개체도최고치위8.7log2.인차,재본연구중구건적중조균주BL21(DE3)능고효표체ε독소,이차해독소구유교고적면역보호성.
