实用儿科临床杂志
實用兒科臨床雜誌
실용인과림상잡지
Journal of Applied Clinical Pediatrics
2010年
12期
885-888,894
,共5页
何亚芳%陈惠金%钱龙华%陈冠仪
何亞芳%陳惠金%錢龍華%陳冠儀
하아방%진혜금%전룡화%진관의
脂多糖%Toll样受体%小胶质细胞%少突胶质细胞前体
脂多糖%Toll樣受體%小膠質細胞%少突膠質細胞前體
지다당%Toll양수체%소효질세포%소돌효질세포전체
目的 探讨脂多糖(LPS)诱导小胶质细胞(MG)激活导致少突胶质细胞(OL)前体死亡的信号转导通路及LPS诱导MG激活的跨膜转导机制.方法 取2日龄Toll样受体4(TLR4)基因缺失小鼠和野型小鼠脑内MG和OL前体共培养,分别分为共培养对照组和共培养LPS组.经LPS 100mg·L-1诱导48 h后,各组共培养细胞,应用硝酸还原酶-比色法检测其-氧化氮(NO)水平、还原-比色法检测其超氧阴离子(O2-)水平,免疫荧光染色法检测其过氧亚硝酸盐(ONOO-)水平,Hochest33342/碘化丙啶荧光染色法观察细胞死亡的形态学改变,流式细胞仪检测其细胞凋亡率.结果 LPS诱导引起野型小鼠共培养细胞内NO和ONOO-水平显著增加,OL前体坏死和凋亡率明显增高.但LPS诱导对TLR4基因缺失小鼠共培养细胞内NO和ONOO-水平以及OL前体坏死及凋亡率均无明显影响.2种小鼠共培养细胞内O2-水平在LPS的诱导下均显著提高.结论 LPS诱导MG激活的跨膜转导机制以及导致OL前体死亡的信号转导通路,必须依赖TLR4的介导.LPS诱导共培养细胞内O2-水平增加可能通过其他非TLR4受体依赖途径.
目的 探討脂多糖(LPS)誘導小膠質細胞(MG)激活導緻少突膠質細胞(OL)前體死亡的信號轉導通路及LPS誘導MG激活的跨膜轉導機製.方法 取2日齡Toll樣受體4(TLR4)基因缺失小鼠和野型小鼠腦內MG和OL前體共培養,分彆分為共培養對照組和共培養LPS組.經LPS 100mg·L-1誘導48 h後,各組共培養細胞,應用硝痠還原酶-比色法檢測其-氧化氮(NO)水平、還原-比色法檢測其超氧陰離子(O2-)水平,免疫熒光染色法檢測其過氧亞硝痠鹽(ONOO-)水平,Hochest33342/碘化丙啶熒光染色法觀察細胞死亡的形態學改變,流式細胞儀檢測其細胞凋亡率.結果 LPS誘導引起野型小鼠共培養細胞內NO和ONOO-水平顯著增加,OL前體壞死和凋亡率明顯增高.但LPS誘導對TLR4基因缺失小鼠共培養細胞內NO和ONOO-水平以及OL前體壞死及凋亡率均無明顯影響.2種小鼠共培養細胞內O2-水平在LPS的誘導下均顯著提高.結論 LPS誘導MG激活的跨膜轉導機製以及導緻OL前體死亡的信號轉導通路,必鬚依賴TLR4的介導.LPS誘導共培養細胞內O2-水平增加可能通過其他非TLR4受體依賴途徑.
목적 탐토지다당(LPS)유도소효질세포(MG)격활도치소돌효질세포(OL)전체사망적신호전도통로급LPS유도MG격활적과막전도궤제.방법 취2일령Toll양수체4(TLR4)기인결실소서화야형소서뇌내MG화OL전체공배양,분별분위공배양대조조화공배양LPS조.경LPS 100mg·L-1유도48 h후,각조공배양세포,응용초산환원매-비색법검측기-양화담(NO)수평、환원-비색법검측기초양음리자(O2-)수평,면역형광염색법검측기과양아초산염(ONOO-)수평,Hochest33342/전화병정형광염색법관찰세포사망적형태학개변,류식세포의검측기세포조망솔.결과 LPS유도인기야형소서공배양세포내NO화ONOO-수평현저증가,OL전체배사화조망솔명현증고.단LPS유도대TLR4기인결실소서공배양세포내NO화ONOO-수평이급OL전체배사급조망솔균무명현영향.2충소서공배양세포내O2-수평재LPS적유도하균현저제고.결론 LPS유도MG격활적과막전도궤제이급도치OL전체사망적신호전도통로,필수의뢰TLR4적개도.LPS유도공배양세포내O2-수평증가가능통과기타비TLR4수체의뢰도경.
