生物工程学报
生物工程學報
생물공정학보
CHINESE JOURNAL OF BIOTECHNOLOGY
2003年
1期
35-40
,共6页
刘继中%纪宗玲%胡蕴玉%陈苏民%朱帮福%杨彤涛
劉繼中%紀宗玲%鬍蘊玉%陳囌民%硃幫福%楊彤濤
류계중%기종령%호온옥%진소민%주방복%양동도
骨保护素%重组腺病毒%破骨细胞
骨保護素%重組腺病毒%破骨細胞
골보호소%중조선병독%파골세포
采用RT-PCR法得到人OPG的编码区cDNA,克隆至穿梭质粒pShuttle,构建重组有OPG编码区cDNA的腺病毒DNA,经Pac I 酶切线性化,在脂质体介导下转染HEK293细胞,制备重组腺病毒并测定病毒滴度约为5×106～1.5×107 pfu/mL.体外感染小鼠成肌细胞C2C12,Western blot及ELISA检测证实有OPG蛋白的表达,并可在细胞培养上清中持续表达6周.感染OPG重组腺病毒的C2C12细胞生长状态良好、细胞周期无明显变化.将重组腺病毒加入体外培养的小鼠骨髓细胞的培养基中,诱导形成的破骨细胞数量及在象牙片上形成的吸收陷窝的数量显著减少(P<0.01).
採用RT-PCR法得到人OPG的編碼區cDNA,剋隆至穿梭質粒pShuttle,構建重組有OPG編碼區cDNA的腺病毒DNA,經Pac I 酶切線性化,在脂質體介導下轉染HEK293細胞,製備重組腺病毒併測定病毒滴度約為5×106～1.5×107 pfu/mL.體外感染小鼠成肌細胞C2C12,Western blot及ELISA檢測證實有OPG蛋白的錶達,併可在細胞培養上清中持續錶達6週.感染OPG重組腺病毒的C2C12細胞生長狀態良好、細胞週期無明顯變化.將重組腺病毒加入體外培養的小鼠骨髓細胞的培養基中,誘導形成的破骨細胞數量及在象牙片上形成的吸收陷窩的數量顯著減少(P<0.01).
채용RT-PCR법득도인OPG적편마구cDNA,극륭지천사질립pShuttle,구건중조유OPG편마구cDNA적선병독DNA,경Pac I 매절선성화,재지질체개도하전염HEK293세포,제비중조선병독병측정병독적도약위5×106～1.5×107 pfu/mL.체외감염소서성기세포C2C12,Western blot급ELISA검측증실유OPG단백적표체,병가재세포배양상청중지속표체6주.감염OPG중조선병독적C2C12세포생장상태량호、세포주기무명현변화.장중조선병독가입체외배양적소서골수세포적배양기중,유도형성적파골세포수량급재상아편상형성적흡수함와적수량현저감소(P<0.01).
