动物医学进展
動物醫學進展
동물의학진전
PROGRESS IN VETERINARY MEDICINE
2005年
5期
62-66
,共5页
黄桂菊%罗满林%刘镇明%贺东生%耿忠海
黃桂菊%囉滿林%劉鎮明%賀東生%耿忠海
황계국%라만림%류진명%하동생%경충해
口蹄疫病毒%VP1基因%克隆%表达
口蹄疫病毒%VP1基因%剋隆%錶達
구제역병독%VP1기인%극륭%표체
用RT-PCR方法扩增口蹄疫病毒VP1基因,并克隆到pgem-t easy 载体中,通过酶切、PCR和测序验证克隆正确,再亚克隆到真核表达载体pcDNA-3.1(+)上,得到重组质粒pcDNA-VP1.根据获得的口蹄疫病毒VP1基因的序列,结合相关的文献资料,设计合成免疫串联片段F,F含有VP1基因的主要抗原位点141位～160位及200位～213位的氨基酸序列,将F片段克隆到真核表达载体pcDNA-3.1(+)中,得到重组质粒pcDNA-F.在脂质体介导下,重组质粒pcDNA-VP1和pcDNA-F转染Vero细胞.间接免疫荧光分析表明VP1基因和F基因均在Vero细胞中成功进行了瞬时表达,为进一步研制FMD基因疫苗奠定了基础.
用RT-PCR方法擴增口蹄疫病毒VP1基因,併剋隆到pgem-t easy 載體中,通過酶切、PCR和測序驗證剋隆正確,再亞剋隆到真覈錶達載體pcDNA-3.1(+)上,得到重組質粒pcDNA-VP1.根據穫得的口蹄疫病毒VP1基因的序列,結閤相關的文獻資料,設計閤成免疫串聯片段F,F含有VP1基因的主要抗原位點141位～160位及200位～213位的氨基痠序列,將F片段剋隆到真覈錶達載體pcDNA-3.1(+)中,得到重組質粒pcDNA-F.在脂質體介導下,重組質粒pcDNA-VP1和pcDNA-F轉染Vero細胞.間接免疫熒光分析錶明VP1基因和F基因均在Vero細胞中成功進行瞭瞬時錶達,為進一步研製FMD基因疫苗奠定瞭基礎.
용RT-PCR방법확증구제역병독VP1기인,병극륭도pgem-t easy 재체중,통과매절、PCR화측서험증극륭정학,재아극륭도진핵표체재체pcDNA-3.1(+)상,득도중조질립pcDNA-VP1.근거획득적구제역병독VP1기인적서렬,결합상관적문헌자료,설계합성면역천련편단F,F함유VP1기인적주요항원위점141위～160위급200위～213위적안기산서렬,장F편단극륭도진핵표체재체pcDNA-3.1(+)중,득도중조질립pcDNA-F.재지질체개도하,중조질립pcDNA-VP1화pcDNA-F전염Vero세포.간접면역형광분석표명VP1기인화F기인균재Vero세포중성공진행료순시표체,위진일보연제FMD기인역묘전정료기출.
