中国男科学杂志
中國男科學雜誌
중국남과학잡지
CHINESE JOURNAL OF ANDROLOGY
2006年
4期
4-6,10
,共4页
FasL启动子%报告基因%表达载体%Leydig细胞%皮质酮
FasL啟動子%報告基因%錶達載體%Leydig細胞%皮質酮
FasL계동자%보고기인%표체재체%Leydig세포%피질동
目的扩增FasL启动子并构建带有FasL启动子的荧光素酶报告质粒,并评价在皮质酮(啮齿类动物体内的糖皮质激素)作用的睾丸Leydig细胞中,由FasL启动子调控的荧光素酶的表达活性.本研究将为进一步分析Leydig细胞中FasL启动子转录调控的作用机制奠定基础.方法采用DNA重组技术构建由FasL启动子调控的荧光素酶报告基因的表达质粒.此重组质粒经阳离子脂质体LipofectAMINE介导,瞬时转染入Leydig细胞中,36h后细胞经皮质酮处理,并于48h时收集细胞.测定荧光素酶的相对表达活性.结果(1)酶切及测序证实成功扩增FasL基因启动子并构建了带有FasL基因启动子的报告基因表达质粒;(2)皮质酮处理的Leydig细胞中FasL启动子调控的荧光素酶表达质粒的表达活性显著增高.结论构建成功的带有FasL启动子的荧光素酶报告质粒可准确地评价FasL启动子在凋亡过程中的作用.
目的擴增FasL啟動子併構建帶有FasL啟動子的熒光素酶報告質粒,併評價在皮質酮(齧齒類動物體內的糖皮質激素)作用的睪汍Leydig細胞中,由FasL啟動子調控的熒光素酶的錶達活性.本研究將為進一步分析Leydig細胞中FasL啟動子轉錄調控的作用機製奠定基礎.方法採用DNA重組技術構建由FasL啟動子調控的熒光素酶報告基因的錶達質粒.此重組質粒經暘離子脂質體LipofectAMINE介導,瞬時轉染入Leydig細胞中,36h後細胞經皮質酮處理,併于48h時收集細胞.測定熒光素酶的相對錶達活性.結果(1)酶切及測序證實成功擴增FasL基因啟動子併構建瞭帶有FasL基因啟動子的報告基因錶達質粒;(2)皮質酮處理的Leydig細胞中FasL啟動子調控的熒光素酶錶達質粒的錶達活性顯著增高.結論構建成功的帶有FasL啟動子的熒光素酶報告質粒可準確地評價FasL啟動子在凋亡過程中的作用.
목적확증FasL계동자병구건대유FasL계동자적형광소매보고질립,병평개재피질동(교치류동물체내적당피질격소)작용적고환Leydig세포중,유FasL계동자조공적형광소매적표체활성.본연구장위진일보분석Leydig세포중FasL계동자전록조공적작용궤제전정기출.방법채용DNA중조기술구건유FasL계동자조공적형광소매보고기인적표체질립.차중조질립경양리자지질체LipofectAMINE개도,순시전염입Leydig세포중,36h후세포경피질동처리,병우48h시수집세포.측정형광소매적상대표체활성.결과(1)매절급측서증실성공확증FasL기인계동자병구건료대유FasL기인계동자적보고기인표체질립;(2)피질동처리적Leydig세포중FasL계동자조공적형광소매표체질립적표체활성현저증고.결론구건성공적대유FasL계동자적형광소매보고질립가준학지평개FasL계동자재조망과정중적작용.