生物技术通讯
生物技術通訊
생물기술통신
LETTERS IN BIOTECHNOLOGY
2007年
3期
416-418,422
,共4页
刘丽凡%赵建增%雷连成%韩文瑜
劉麗凡%趙建增%雷連成%韓文瑜
류려범%조건증%뢰련성%한문유
乳杆菌素%Gassericin T%基因合成%融合表达%抗菌活性
乳桿菌素%Gassericin T%基因閤成%融閤錶達%抗菌活性
유간균소%Gassericin T%기인합성%융합표체%항균활성
目的:在大肠杆菌系统中表达有抗菌活性的乳酸菌素Gassericin T.方法:根据乳酸菌素Gassericin T的基因序列,把Gassericin T的结构基因gatA编码的氨基酸的密码子转换成大肠杆菌偏爱的形式;用人工合成的寡核苷酸片段,通过重叠PCR法扩增得到gatA片段(gat基因);将合成的gat基因插入pGEX-4T-1,构建pGEx-4T-1-gat融合表达载体,转化大肠杆菌DH5α株,IPTG诱导表达,经超声裂解后获得包涵体蛋白,经溶解、变性、复性处理后获得GST-Gassericin T融合蛋白;用琼脂扩散法测定其对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、李斯特菌、枯草杆菌等的抗菌活性.结果与结论:采用pGEX-4T-1融合表达系统在大肠杆菌中表达了有活性的Gassericin T,融合蛋白以包涵体形式存在.复性的融合蛋白对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌有明显的抑制作用,对李斯特菌的抑制作用不明显.
目的:在大腸桿菌繫統中錶達有抗菌活性的乳痠菌素Gassericin T.方法:根據乳痠菌素Gassericin T的基因序列,把Gassericin T的結構基因gatA編碼的氨基痠的密碼子轉換成大腸桿菌偏愛的形式;用人工閤成的寡覈苷痠片段,通過重疊PCR法擴增得到gatA片段(gat基因);將閤成的gat基因插入pGEX-4T-1,構建pGEx-4T-1-gat融閤錶達載體,轉化大腸桿菌DH5α株,IPTG誘導錶達,經超聲裂解後穫得包涵體蛋白,經溶解、變性、複性處理後穫得GST-Gassericin T融閤蛋白;用瓊脂擴散法測定其對金黃色葡萄毬菌、大腸桿菌、李斯特菌、枯草桿菌等的抗菌活性.結果與結論:採用pGEX-4T-1融閤錶達繫統在大腸桿菌中錶達瞭有活性的Gassericin T,融閤蛋白以包涵體形式存在.複性的融閤蛋白對金黃色葡萄毬菌和大腸桿菌有明顯的抑製作用,對李斯特菌的抑製作用不明顯.
목적:재대장간균계통중표체유항균활성적유산균소Gassericin T.방법:근거유산균소Gassericin T적기인서렬,파Gassericin T적결구기인gatA편마적안기산적밀마자전환성대장간균편애적형식;용인공합성적과핵감산편단,통과중첩PCR법확증득도gatA편단(gat기인);장합성적gat기인삽입pGEX-4T-1,구건pGEx-4T-1-gat융합표체재체,전화대장간균DH5α주,IPTG유도표체,경초성렬해후획득포함체단백,경용해、변성、복성처리후획득GST-Gassericin T융합단백;용경지확산법측정기대금황색포도구균、대장간균、리사특균、고초간균등적항균활성.결과여결론:채용pGEX-4T-1융합표체계통재대장간균중표체료유활성적Gassericin T,융합단백이포함체형식존재.복성적융합단백대금황색포도구균화대장간균유명현적억제작용,대리사특균적억제작용불명현.
