现代生物医学进展
現代生物醫學進展
현대생물의학진전
PROGRESS IN MODERN BIOMEDICINE
2008年
8期
1445-1448
,共4页
王庆忠%张鹭%马国举%廖海印%王洪海
王慶忠%張鷺%馬國舉%廖海印%王洪海
왕경충%장로%마국거%료해인%왕홍해
结核分枝杆菌%clpP蛋白%Rv2461c%蛋白表达%亚细胞定位
結覈分枝桿菌%clpP蛋白%Rv2461c%蛋白錶達%亞細胞定位
결핵분지간균%clpP단백%Rv2461c%단백표체%아세포정위
目的:探索结核分枝杆菌Rv2461c基因编码的elpP蛋白作为结核检测抗原的可行性.方法:克隆结核分枝杆菌clpP蛋白的编码基因Rv2461e,构建pET30a-Rv2461c重组质粒,并将其成功的转化到大肠杆菌JF1125克隆栽体中,测序鉴定结果正确.将pET30a-Rv2461c重组质粒转化到大肠杆茵BL21中,表达纯化目的蛋白进行质谱分析.制备clpP蛋白的多克隆抗体,通过亚细胞分离及Western检测分析蛋白的亚细胞定位,纯化的clpP蛋白通过间接ELISA实验进行抗原性的初步检测.结果:结核分枝杆茵clpP蛋白大量存在于细胞质中,少量存在于细胞壁和细胞膜中.重组抗原在检测肺结核病人中的检出率为38.3%(23/60),检测敏感性为38-3%,特异性为90%.结论:为后续深入研究clpP蛋白的生物功能、clpP作为诊断靶标、药靶候选蛋白的可行性提供了基础.
目的:探索結覈分枝桿菌Rv2461c基因編碼的elpP蛋白作為結覈檢測抗原的可行性.方法:剋隆結覈分枝桿菌clpP蛋白的編碼基因Rv2461e,構建pET30a-Rv2461c重組質粒,併將其成功的轉化到大腸桿菌JF1125剋隆栽體中,測序鑒定結果正確.將pET30a-Rv2461c重組質粒轉化到大腸桿茵BL21中,錶達純化目的蛋白進行質譜分析.製備clpP蛋白的多剋隆抗體,通過亞細胞分離及Western檢測分析蛋白的亞細胞定位,純化的clpP蛋白通過間接ELISA實驗進行抗原性的初步檢測.結果:結覈分枝桿茵clpP蛋白大量存在于細胞質中,少量存在于細胞壁和細胞膜中.重組抗原在檢測肺結覈病人中的檢齣率為38.3%(23/60),檢測敏感性為38-3%,特異性為90%.結論:為後續深入研究clpP蛋白的生物功能、clpP作為診斷靶標、藥靶候選蛋白的可行性提供瞭基礎.
목적:탐색결핵분지간균Rv2461c기인편마적elpP단백작위결핵검측항원적가행성.방법:극륭결핵분지간균clpP단백적편마기인Rv2461e,구건pET30a-Rv2461c중조질립,병장기성공적전화도대장간균JF1125극륭재체중,측서감정결과정학.장pET30a-Rv2461c중조질립전화도대장간인BL21중,표체순화목적단백진행질보분석.제비clpP단백적다극륭항체,통과아세포분리급Western검측분석단백적아세포정위,순화적clpP단백통과간접ELISA실험진행항원성적초보검측.결과:결핵분지간인clpP단백대량존재우세포질중,소량존재우세포벽화세포막중.중조항원재검측폐결핵병인중적검출솔위38.3%(23/60),검측민감성위38-3%,특이성위90%.결론:위후속심입연구clpP단백적생물공능、clpP작위진단파표、약파후선단백적가행성제공료기출.
