"睡美人"转座子系统介导EGFP转染鸡SSCs条件优化的研究
"수미인"전좌자계통개도EGFP전염계SSCs조건우화적연구
Optimizing Conditions of Transfecting Chicken SSCs with EGFP by the Sleeping Beauty Transposon
  • 万方数据
    中国家禽 중국가금
    CHINA POULTRY
    2009年 1期 10-14 ,共5页

    李碧春%陈强%高波%田智泉%余飞%何先红%宋成义%常国斌%王克华

    리벽춘%진강%고파%전지천%여비%하선홍%송성의%상국빈%왕극화

    转座子%电穿孔%精原干细胞%增强型绿色荧光蛋白 轉座子%電穿孔%精原榦細胞%增彊型綠色熒光蛋白
    전좌자%전천공%정원간세포%증강형록색형광단백
    利用"睡美人"转座子系统介导增强型绿色荧光蛋白(Enhanced Green Fluorescent Protein,EGFP)报告基因,比较和优化了电穿孔转染条件和精原干细胞(spermatogonial stem cells,SSCs)对G418的耐受能力.结果表明,在SB与PT-EGFP的比为1:10,质粒浓度为15μg/mL,细胞处于对数生长期,且细胞密度为106~107/mL时,精原干细胞在电场强度为270V,脉冲时程为80μs,转染后在4℃静置10 min的条件下转染效率最高.浓度为400 μg/mL的G418对转染后的SSCs进行快速筛选6d时,出现了EGFP阳性克隆.
    이용"수미인"전좌자계통개도증강형록색형광단백(Enhanced Green Fluorescent Protein,EGFP)보고기인,비교화우화료전천공전염조건화정원간세포(spermatogonial stem cells,SSCs)대G418적내수능력.결과표명,재SB여PT-EGFP적비위1:10,질립농도위15μg/mL,세포처우대수생장기,차세포밀도위106~107/mL시,정원간세포재전장강도위270V,맥충시정위80μs,전염후재4℃정치10 min적조건하전염효솔최고.농도위400 μg/mL적G418대전염후적SSCs진행쾌속사선6d시,출현료EGFP양성극륭.
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