CAJ | 학술논문

背景与目的:地塞米松衍生物(9-氟-16α-甲基11β,17-二羟基-3-氧-1,4-雄二烯-17β-羧酸)具有优于地塞米松的抗肿瘤活性,为探讨其抗肿瘤机制,本研究利用酵母三杂交技术在活细胞内筛选与之相互作用的靶蛋白.方法:构建诱饵质粒pGBKT7-GRα-LBD,利用酵母三杂交技术从人K562细胞cDNA文库中筛选与地塞米松衍生物相互作用的靶蛋白.结果:诱饵质粒成功构建,经Westernblot分析可表达约31 ku的诱饵蛋白.且诱饵蛋白没有毒性、渗漏和自激活现象.利用酵母三杂交技术从人K562细胞cDNA文库中筛选到37个能与地塞米松衍生物相互作用的蛋白质,并经酵母回转实验验证,得到20个真阳性克隆.结论:通过酵母三杂交技术在活细胞内筛选到20个与地塞米松衍生物有相互作用的蛋白.
배경여목적:지새미송연생물(9-불-16α-갑기11β,17-이간기-3-양-1,4-웅이희-17β-최산)구유우우지새미송적항종류활성,위탐토기항종류궤제,본연구이용효모삼잡교기술재활세포내사선여지상호작용적파단백.방법:구건유이질립pGBKT7-GRα-LBD,이용효모삼잡교기술종인K562세포cDNA문고중사선여지새미송연생물상호작용적파단백.결과:유이질립성공구건,경Westernblot분석가표체약31 ku적유이단백.차유이단백몰유독성、삼루화자격활현상.이용효모삼잡교기술종인K562세포cDNA문고중사선도37개능여지새미송연생물상호작용적단백질,병경효모회전실험험증,득도20개진양성극륭.결론:통과효모삼잡교기술재활세포내사선도20개여지새미송연생물유상호작용적단백.