丙型肝炎病毒(HCV)截短型E2的原核表达和蛋白纯化
병형간염병독(HCV)절단형E2적원핵표체화단백순화
Prokaryotic Expression and Purification of Truncated Hepatitis C Virus Envelope Glycoprotein E2
  • 万方数据
    科学技术与工程 과학기술여공정
    SCIENCE TECHNOLOGY AND ENGINEERING
    2009年 9期 2296-2298,2303 ,共4页

    姚敏%方海亮%尹文%雷迎峰%杨敬%孙梦宁%田江红%吕欣

    요민%방해량%윤문%뢰영봉%양경%손몽저%전강홍%려흔

    丙型肝炎病毒%包膜糖蛋白E2%原核表达 丙型肝炎病毒%包膜糖蛋白E2%原覈錶達
    병형간염병독%포막당단백E2%원핵표체
    对丙型肝炎病毒(HCV)截短型包膜糖蛋白E2-661基因进行原核表达和纯化.利用PCR法扩增出661 bp的截短型HCV E2区基因片段,并将测序正确的E2-661基因克隆入原核表达载体pET28a中,转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达后,通过SDS-PAGE和Western-blot对表达产物进行分析和鉴定.结果表明目的蛋白分子量约为35 kDa,主要以包涵体形式大量存在.Western-blot结果显示目的蛋白与抗His标签单抗及HCV阳性血清均具有良好的反应原性.并通过镍离子亲和层析方法获得纯化的重组蛋白.以上结果为HCV E2功能的进一步研究奠定了基础.
    대병형간염병독(HCV)절단형포막당단백E2-661기인진행원핵표체화순화.이용PCR법확증출661 bp적절단형HCV E2구기인편단,병장측서정학적E2-661기인극륭입원핵표체재체pET28a중,전화대장간균BL21(DE3),경IPTG유도표체후,통과SDS-PAGE화Western-blot대표체산물진행분석화감정.결과표명목적단백분자량약위35 kDa,주요이포함체형식대량존재.Western-blot결과현시목적단백여항His표첨단항급HCV양성혈청균구유량호적반응원성.병통과얼리자친화층석방법획득순화적중조단백.이상결과위HCV E2공능적진일보연구전정료기출.
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