检验医学
檢驗醫學
검험의학
LABORATORY MEDICINE
2009年
5期
355-360
,共6页
卢培%陆慧琦%韩焕兴%朱学源%黄秋芳%龚炜
盧培%陸慧琦%韓煥興%硃學源%黃鞦芳%龔煒
로배%륙혜기%한환흥%주학원%황추방%공위
血管内皮生长因子-C%血管内皮生长因子受体-3%食管癌%淋巴结转移%实时荧光定量逆转录聚合酶链反应
血管內皮生長因子-C%血管內皮生長因子受體-3%食管癌%淋巴結轉移%實時熒光定量逆轉錄聚閤酶鏈反應
혈관내피생장인자-C%혈관내피생장인자수체-3%식관암%림파결전이%실시형광정량역전록취합매련반응
目的 建立测定血管内皮生长因子-C(VEGF-C) mRNA和血管内皮生长因子受体-3 (VEGFR-3) mRNA的实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(FQ-RT-PCR),探讨其在食管癌组织及其癌旁组织中的表达水平.方法 分别以自行构建和克隆的pMD18-VEGF-C和pMD18-VEGFR-3质粒作为定量模板,用循环阈值(Ct)定量起始的模板,在荧光TaqMan方法的基础上建立了测定VEGF-C mRNA和VEGFR-3 mRNA的实时FQ-RT-PCR,并分别测定了40例食管癌组织及其癌旁组织中VEGF-C mRNA和VEGFR-3 mRNA的表达水平.结果 VEGF-C mRNA和VEGFR-3 mRNA测定的线性范围均为103~108拷贝/μg总RNA;VEGF-C mRNA和VEGFR-3 mRNA高、低值的批内、批间变异系数(CV)在7.07%~12.49%之间.VEGF-C mRNA主要表达在癌组织中,而VEGFR-3 mRNA在癌组织与癌旁组织中表达无差异;VEGF-C mRNA与VEGFR-3 mRNA在癌组织与癌旁组织中表达存在相关性;24例淋巴结转移食管癌患者癌组织及其癌旁组织VEGF-C mRNA和VEGFR-3 mRNA水平与16例无淋巴结转移食管癌患者癌组织及其癌旁组织存在显著差异,提示有淋巴结转移的食管癌组织及其癌旁组织VEGF-C和VEGFR-3基因表达水平上调.VEGF-C mRNA和VEGFR-3 mRNA的表达水平与食管癌临床病理分期有密切关系.结论 我们建立的测定VEGF-C mRNA和VEGFR-3 mRNA的实时FQ-RT-PCR灵敏、稳定、重现性好,可供VEGF-C、VEGFR-3基因表达的临床检测和研究.VEGF-C mRNA和VEGFR-3 mRNA基因表达水平可作为食管癌淋巴结转移的预测指标,亦可作为分子水平上判定食管癌临床分期的辅助指标之一.
目的 建立測定血管內皮生長因子-C(VEGF-C) mRNA和血管內皮生長因子受體-3 (VEGFR-3) mRNA的實時熒光定量逆轉錄聚閤酶鏈反應(FQ-RT-PCR),探討其在食管癌組織及其癌徬組織中的錶達水平.方法 分彆以自行構建和剋隆的pMD18-VEGF-C和pMD18-VEGFR-3質粒作為定量模闆,用循環閾值(Ct)定量起始的模闆,在熒光TaqMan方法的基礎上建立瞭測定VEGF-C mRNA和VEGFR-3 mRNA的實時FQ-RT-PCR,併分彆測定瞭40例食管癌組織及其癌徬組織中VEGF-C mRNA和VEGFR-3 mRNA的錶達水平.結果 VEGF-C mRNA和VEGFR-3 mRNA測定的線性範圍均為103~108拷貝/μg總RNA;VEGF-C mRNA和VEGFR-3 mRNA高、低值的批內、批間變異繫數(CV)在7.07%~12.49%之間.VEGF-C mRNA主要錶達在癌組織中,而VEGFR-3 mRNA在癌組織與癌徬組織中錶達無差異;VEGF-C mRNA與VEGFR-3 mRNA在癌組織與癌徬組織中錶達存在相關性;24例淋巴結轉移食管癌患者癌組織及其癌徬組織VEGF-C mRNA和VEGFR-3 mRNA水平與16例無淋巴結轉移食管癌患者癌組織及其癌徬組織存在顯著差異,提示有淋巴結轉移的食管癌組織及其癌徬組織VEGF-C和VEGFR-3基因錶達水平上調.VEGF-C mRNA和VEGFR-3 mRNA的錶達水平與食管癌臨床病理分期有密切關繫.結論 我們建立的測定VEGF-C mRNA和VEGFR-3 mRNA的實時FQ-RT-PCR靈敏、穩定、重現性好,可供VEGF-C、VEGFR-3基因錶達的臨床檢測和研究.VEGF-C mRNA和VEGFR-3 mRNA基因錶達水平可作為食管癌淋巴結轉移的預測指標,亦可作為分子水平上判定食管癌臨床分期的輔助指標之一.
목적 건립측정혈관내피생장인자-C(VEGF-C) mRNA화혈관내피생장인자수체-3 (VEGFR-3) mRNA적실시형광정량역전록취합매련반응(FQ-RT-PCR),탐토기재식관암조직급기암방조직중적표체수평.방법 분별이자행구건화극륭적pMD18-VEGF-C화pMD18-VEGFR-3질립작위정량모판,용순배역치(Ct)정량기시적모판,재형광TaqMan방법적기출상건립료측정VEGF-C mRNA화VEGFR-3 mRNA적실시FQ-RT-PCR,병분별측정료40례식관암조직급기암방조직중VEGF-C mRNA화VEGFR-3 mRNA적표체수평.결과 VEGF-C mRNA화VEGFR-3 mRNA측정적선성범위균위103~108고패/μg총RNA;VEGF-C mRNA화VEGFR-3 mRNA고、저치적비내、비간변이계수(CV)재7.07%~12.49%지간.VEGF-C mRNA주요표체재암조직중,이VEGFR-3 mRNA재암조직여암방조직중표체무차이;VEGF-C mRNA여VEGFR-3 mRNA재암조직여암방조직중표체존재상관성;24례림파결전이식관암환자암조직급기암방조직VEGF-C mRNA화VEGFR-3 mRNA수평여16례무림파결전이식관암환자암조직급기암방조직존재현저차이,제시유림파결전이적식관암조직급기암방조직VEGF-C화VEGFR-3기인표체수평상조.VEGF-C mRNA화VEGFR-3 mRNA적표체수평여식관암림상병리분기유밀절관계.결론 아문건립적측정VEGF-C mRNA화VEGFR-3 mRNA적실시FQ-RT-PCR령민、은정、중현성호,가공VEGF-C、VEGFR-3기인표체적림상검측화연구.VEGF-C mRNA화VEGFR-3 mRNA기인표체수평가작위식관암림파결전이적예측지표,역가작위분자수평상판정식관암림상분기적보조지표지일.