现代肿瘤医学
現代腫瘤醫學
현대종류의학
JOURNAL OF MODERN ONCOLOGY
2009年
7期
1207-1210
,共4页
刘树立%李庆昌%谢成耀%邱雪杉%王恩华
劉樹立%李慶昌%謝成耀%邱雪杉%王恩華
류수립%리경창%사성요%구설삼%왕은화
肝癌%Tet-off基因表达系统%间隙连接蛋白
肝癌%Tet-off基因錶達繫統%間隙連接蛋白
간암%Tet-off기인표체계통%간극련접단백
目的:利用Tet-off基因表达体系建立人间隙连接蛋白Connexin32基因可调控表达的肝癌细胞系,为探讨Connexin32蛋白表达与肝癌细胞的增殖、运动和侵袭能力的相关性奠定基础.方法:利用基因重组方法建立人Connexin32 cDNA的逆病毒表达载体pRevTRE-Cx32;利用逆病毒感染法将Connexin32表达载体和调控质粒pRevTet-off转入人肝癌细胞系HuH7中,筛选出稳定整合了两种载体的细胞克隆;western-blot法检测Connexin32蛋白表达的诱导率.结果:建立了可以通过向细胞培养液中添加或去除Doxycycline调控Connexin32蛋白表达的肝癌细胞HuH7亚克隆,western-blot结果显示当从细胞培养液中去除Doxycycline后,Connexin32表达明显升高,呈现4倍左右的诱导率.结论:成功建立了Connexin32蛋白可诱导表达的肝癌细胞HuH7 Tet-off Cx32亚克隆.
目的:利用Tet-off基因錶達體繫建立人間隙連接蛋白Connexin32基因可調控錶達的肝癌細胞繫,為探討Connexin32蛋白錶達與肝癌細胞的增殖、運動和侵襲能力的相關性奠定基礎.方法:利用基因重組方法建立人Connexin32 cDNA的逆病毒錶達載體pRevTRE-Cx32;利用逆病毒感染法將Connexin32錶達載體和調控質粒pRevTet-off轉入人肝癌細胞繫HuH7中,篩選齣穩定整閤瞭兩種載體的細胞剋隆;western-blot法檢測Connexin32蛋白錶達的誘導率.結果:建立瞭可以通過嚮細胞培養液中添加或去除Doxycycline調控Connexin32蛋白錶達的肝癌細胞HuH7亞剋隆,western-blot結果顯示噹從細胞培養液中去除Doxycycline後,Connexin32錶達明顯升高,呈現4倍左右的誘導率.結論:成功建立瞭Connexin32蛋白可誘導錶達的肝癌細胞HuH7 Tet-off Cx32亞剋隆.
목적:이용Tet-off기인표체체계건립인간극련접단백Connexin32기인가조공표체적간암세포계,위탐토Connexin32단백표체여간암세포적증식、운동화침습능력적상관성전정기출.방법:이용기인중조방법건립인Connexin32 cDNA적역병독표체재체pRevTRE-Cx32;이용역병독감염법장Connexin32표체재체화조공질립pRevTet-off전입인간암세포계HuH7중,사선출은정정합료량충재체적세포극륭;western-blot법검측Connexin32단백표체적유도솔.결과:건립료가이통과향세포배양액중첨가혹거제Doxycycline조공Connexin32단백표체적간암세포HuH7아극륭,western-blot결과현시당종세포배양액중거제Doxycycline후,Connexin32표체명현승고,정현4배좌우적유도솔.결론:성공건립료Connexin32단백가유도표체적간암세포HuH7 Tet-off Cx32아극륭.
