CAJ | 학술논문

体外成熟的卵母细胞存在核成熟与胞质成熟不一致的情况,从而使得体外成熟的卵母细胞质量不高.本实验采用cdc2激酶抑制剂丁内酯-Ⅰ (butyrolactone Ⅰ,BL-Ⅰ)抑制猪卵母细胞核体外成熟,期望解决卵母细胞体外培养过程中细胞核与细胞质发育的不同步问题.结果表明,分别用0、10、20、40和80 μmol/LBL-Ⅰ处理猪卵母细胞44 h后,对卵母细胞成熟的抑制程度与BL-Ⅰ浓度的升高成正比.用20、40和80μmol/L处理时,处于生发泡(GV)期的卵母细胞分别为25％、47％和67％,与对照组(5％)相比差异极显著(P＜0.01)；而到达MⅡ期的卵母细胞分别为38％、9％和0,与对照组(67％)相比差异极显著(P＜0.01).将20、40和80 μmol/L处理44 h后的卵母细胞,再在不含BL-Ⅰ的卵母细胞体外成熟培养液中培养44 h后,到达MⅡ期的卵母细胞为57％、41％和5％,与抑制44 h时相比均有显著差异,表明BL-Ⅰ对卵母细胞成熟的抑制作用是可逆的.20 μmol/L BL-Ⅰ抑制培养20 h再正常培养24 h(20 h++24 h-处理组)后卵母细胞的成熟率显著低于对照组(正常培养44 h)(65.6％vs 70.1％,P＜0.05).对20 h++24 h-处理组成熟的卵母细胞进行孤雌激活,其卵裂率、囊胚率和囊胚总细胞数均好于对照组,但无显著差异；对20 h++24 h-处理组成熟的卵母细胞进行核移植(NT),获得重构胚的卵裂率、囊胚率和囊胚总细胞数均优于对照组,并且卵裂率有显著差异(68.9％vs 62.4％,P＜0.05).结果提示BL-Ⅰ处理对猪卵母细胞的核成熟有明显抑制作用,这种抑制作用是可逆的,对猪卵母细胞孤雌胚胎发育能力和核移植胚胎的发育能力有一定的提高.
체외성숙적란모세포존재핵성숙여포질성숙불일치적정황,종이사득체외성숙적란모세포질량불고.본실험채용cdc2격매억제제정내지-Ⅰ (butyrolactone Ⅰ,BL-Ⅰ)억제저란모세포핵체외성숙,기망해결란모세포체외배양과정중세포핵여세포질발육적불동보문제.결과표명,분별용0、10、20、40화80 μmol/LBL-Ⅰ처리저란모세포44 h후,대란모세포성숙적억제정도여BL-Ⅰ농도적승고성정비.용20、40화80μmol/L처리시,처우생발포(GV)기적란모세포분별위25％、47％화67％,여대조조(5％)상비차이겁현저(P＜0.01)；이도체MⅡ기적란모세포분별위38％、9％화0,여대조조(67％)상비차이겁현저(P＜0.01).장20、40화80 μmol/L처리44 h후적란모세포,재재불함BL-Ⅰ적란모세포체외성숙배양액중배양44 h후,도체MⅡ기적란모세포위57％、41％화5％,여억제44 h시상비균유현저차이,표명BL-Ⅰ대란모세포성숙적억제작용시가역적.20 μmol/L BL-Ⅰ억제배양20 h재정상배양24 h(20 h++24 h-처리조)후란모세포적성숙솔현저저우대조조(정상배양44 h)(65.6％vs 70.1％,P＜0.05).대20 h++24 h-처리조성숙적란모세포진행고자격활,기란렬솔、낭배솔화낭배총세포수균호우대조조,단무현저차이；대20 h++24 h-처리조성숙적란모세포진행핵이식(NT),획득중구배적란렬솔、낭배솔화낭배총세포수균우우대조조,병차란렬솔유현저차이(68.9％vs 62.4％,P＜0.05).결과제시BL-Ⅰ처리대저란모세포적핵성숙유명현억제작용,저충억제작용시가역적,대저란모세포고자배태발육능력화핵이식배태적발육능력유일정적제고.