中国畜牧兽医
中國畜牧獸醫
중국축목수의
CHINA ANIMAL HUSBANDRY & VETERINARY MEDICINE
2012年
10期
154-159
,共6页
苏小虎%高峰%刘迎春%王宏%张焱如%周欢敏
囌小虎%高峰%劉迎春%王宏%張焱如%週歡敏
소소호%고봉%류영춘%왕굉%장염여%주환민
绒山羊%干细胞%分离%鉴定
絨山羊%榦細胞%分離%鑒定
융산양%간세포%분리%감정
以0.02％胰酶4℃过夜消化,分离表皮,37℃消化30 min,打成单细胞悬液,经100 μg/mL Ⅳ型胶原处理的培养皿黏附10 min,除掉未黏附的细胞,加入培养基(80％ DMEM-F12+20％ FBS+氢化可的松(25 μg/mL)+青霉素(100 IU/mL)+链霉素(100 μg/mL)+胰岛素(15 μg/mL)+转铁蛋白+EGF(20 μg/mL))培养24 h,而后将此细胞消化接种到经20 μg/mL丝裂霉素C处理4h的成年绒山羊成纤维细胞滋养层上,培养2周后有各种形态的克隆状细胞集落出现,用碱性磷酸酶(AKP)染色呈深黑紫色,初步判断细胞呈阳性.本研究旨在分离绒山羊皮肤干细胞,为研究干细胞分化机制,探索绒毛发育机理,培育高产高质绒毛性状奠定分子育种理论基础.
以0.02％胰酶4℃過夜消化,分離錶皮,37℃消化30 min,打成單細胞懸液,經100 μg/mL Ⅳ型膠原處理的培養皿黏附10 min,除掉未黏附的細胞,加入培養基(80％ DMEM-F12+20％ FBS+氫化可的鬆(25 μg/mL)+青黴素(100 IU/mL)+鏈黴素(100 μg/mL)+胰島素(15 μg/mL)+轉鐵蛋白+EGF(20 μg/mL))培養24 h,而後將此細胞消化接種到經20 μg/mL絲裂黴素C處理4h的成年絨山羊成纖維細胞滋養層上,培養2週後有各種形態的剋隆狀細胞集落齣現,用堿性燐痠酶(AKP)染色呈深黑紫色,初步判斷細胞呈暘性.本研究旨在分離絨山羊皮膚榦細胞,為研究榦細胞分化機製,探索絨毛髮育機理,培育高產高質絨毛性狀奠定分子育種理論基礎.
이0.02％이매4℃과야소화,분리표피,37℃소화30 min,타성단세포현액,경100 μg/mL Ⅳ형효원처리적배양명점부10 min,제도미점부적세포,가입배양기(80％ DMEM-F12+20％ FBS+경화가적송(25 μg/mL)+청매소(100 IU/mL)+련매소(100 μg/mL)+이도소(15 μg/mL)+전철단백+EGF(20 μg/mL))배양24 h,이후장차세포소화접충도경20 μg/mL사렬매소C처리4h적성년융산양성섬유세포자양층상,배양2주후유각충형태적극륭상세포집락출현,용감성린산매(AKP)염색정심흑자색,초보판단세포정양성.본연구지재분리융산양피부간세포,위연구간세포분화궤제,탐색융모발육궤리,배육고산고질융모성상전정분자육충이론기출.
