寄生虫与医学昆虫学报
寄生蟲與醫學昆蟲學報
기생충여의학곤충학보
ACTA PARASITOLOGICA ET MEDICA ENTOMOLOGICA SINICA
2003年
3期
134-138
,共5页
张立民%傅玉才%由弘%王进成
張立民%傅玉纔%由弘%王進成
장립민%부옥재%유홍%왕진성
细粒棘球绦虫%EgA31融合蛋白%疫苗
細粒棘毬縚蟲%EgA31融閤蛋白%疫苗
세립극구조충%EgA31융합단백%역묘
目的:构建细粒棘球绦虫疫苗候选分子EgA31重组质粒,表达及纯化EgA31/GST融合蛋白,为疫苗的研究奠定基础.方法:PCR扩增EgA31cDNA,将得到的cDNA经限制性内切酶酶切,然后亚克隆入pGEX-5X-3质粒,转化BL21宿主菌,IPTG诱导重组质粒的表达,亲和层析纯化表达产物,Bradford法测定重组蛋白含量,用SDS-PAGE和Westernblot进行分析鉴定.结果:SDS-PAGE显示分离纯化的EgA31/GST融合蛋白为45kDa,测序检验重组质粒中EgA31cDNA序列正确.EgA31/GST融合蛋白免疫豚鼠得到的抗血清可与细粒棘球绦虫原头蚴总蛋白在66kDa处特异性反应.结论:EgA31/GST融合蛋白获得高效表达,并成功纯化,初步实验证明具有良好的免疫原性,可用于进一步疫苗的免疫注射实验.
目的:構建細粒棘毬縚蟲疫苗候選分子EgA31重組質粒,錶達及純化EgA31/GST融閤蛋白,為疫苗的研究奠定基礎.方法:PCR擴增EgA31cDNA,將得到的cDNA經限製性內切酶酶切,然後亞剋隆入pGEX-5X-3質粒,轉化BL21宿主菌,IPTG誘導重組質粒的錶達,親和層析純化錶達產物,Bradford法測定重組蛋白含量,用SDS-PAGE和Westernblot進行分析鑒定.結果:SDS-PAGE顯示分離純化的EgA31/GST融閤蛋白為45kDa,測序檢驗重組質粒中EgA31cDNA序列正確.EgA31/GST融閤蛋白免疫豚鼠得到的抗血清可與細粒棘毬縚蟲原頭蚴總蛋白在66kDa處特異性反應.結論:EgA31/GST融閤蛋白穫得高效錶達,併成功純化,初步實驗證明具有良好的免疫原性,可用于進一步疫苗的免疫註射實驗.
목적:구건세립극구조충역묘후선분자EgA31중조질립,표체급순화EgA31/GST융합단백,위역묘적연구전정기출.방법:PCR확증EgA31cDNA,장득도적cDNA경한제성내절매매절,연후아극륭입pGEX-5X-3질립,전화BL21숙주균,IPTG유도중조질립적표체,친화층석순화표체산물,Bradford법측정중조단백함량,용SDS-PAGE화Westernblot진행분석감정.결과:SDS-PAGE현시분리순화적EgA31/GST융합단백위45kDa,측서검험중조질립중EgA31cDNA서렬정학.EgA31/GST융합단백면역돈서득도적항혈청가여세립극구조충원두유총단백재66kDa처특이성반응.결론:EgA31/GST융합단백획득고효표체,병성공순화,초보실험증명구유량호적면역원성,가용우진일보역묘적면역주사실험.
