苏州大学学报(医学版)
囌州大學學報(醫學版)
소주대학학보(의학판)
SUZHOU UNIVERSITY JOURNAL OF MEDICAL SCIENCE
2004年
1期
18-21
,共4页
GM-CSF%JAK2%STAT3%TF-1细胞系
GM-CSF%JAK2%STAT3%TF-1細胞繫
GM-CSF%JAK2%STAT3%TF-1세포계
目的探索JAK/STAT途径活化与细胞增殖和凋亡之间的关系.方法通过表达内源性GM-CSF受体的TF-1细胞,观察细胞增殖与凋亡;建立免疫沉淀和Western blot印迹方法,检测经GM-CSF 100 ng/ml瞬时诱导的TF-1细胞信号蛋白JAK2和STAT3酪氨酸磷酸化情况.结果经过GM-CSF刺激,细胞不但免于凋亡,TF-1细胞还呈现剂量与时间信赖性的增殖反应.当耗竭细胞因子6～12 h后,倒置显微镜下TF-1细胞呈现折光性改变,细胞开始凋亡,呈现凋亡特征性形态改变和出现DNA梯形条带,而加入0.1 ng/ml的GM-CSF,TF-1细胞即开始进入增殖状态,提示GM-CSF对细胞具有凋亡保护作用.经过100 ng/ml GM-CSF的瞬时诱导,在分子量130 kd区域见到JAK2蛋白条带,显示GM-CSF可诱导TF-1细胞磷酸化JAK2表达;而在分子量90 kd区域未见到STAT3蛋白条带,显示无磷酸化STAT3表达;而未经GM-CSF诱导的TF-1细胞,既无磷酸化JAK2也无磷酸化STAT3表达.结论 GM-CSF为TF-1细胞增殖诱导和凋亡保护所必需;GM-CSF诱导的TF-1细胞生物学效应涉及到胞浆信号分子JAK2磷酸化而非STAT3磷酸化.
目的探索JAK/STAT途徑活化與細胞增殖和凋亡之間的關繫.方法通過錶達內源性GM-CSF受體的TF-1細胞,觀察細胞增殖與凋亡;建立免疫沉澱和Western blot印跡方法,檢測經GM-CSF 100 ng/ml瞬時誘導的TF-1細胞信號蛋白JAK2和STAT3酪氨痠燐痠化情況.結果經過GM-CSF刺激,細胞不但免于凋亡,TF-1細胞還呈現劑量與時間信賴性的增殖反應.噹耗竭細胞因子6～12 h後,倒置顯微鏡下TF-1細胞呈現摺光性改變,細胞開始凋亡,呈現凋亡特徵性形態改變和齣現DNA梯形條帶,而加入0.1 ng/ml的GM-CSF,TF-1細胞即開始進入增殖狀態,提示GM-CSF對細胞具有凋亡保護作用.經過100 ng/ml GM-CSF的瞬時誘導,在分子量130 kd區域見到JAK2蛋白條帶,顯示GM-CSF可誘導TF-1細胞燐痠化JAK2錶達;而在分子量90 kd區域未見到STAT3蛋白條帶,顯示無燐痠化STAT3錶達;而未經GM-CSF誘導的TF-1細胞,既無燐痠化JAK2也無燐痠化STAT3錶達.結論 GM-CSF為TF-1細胞增殖誘導和凋亡保護所必需;GM-CSF誘導的TF-1細胞生物學效應涉及到胞漿信號分子JAK2燐痠化而非STAT3燐痠化.
목적탐색JAK/STAT도경활화여세포증식화조망지간적관계.방법통과표체내원성GM-CSF수체적TF-1세포,관찰세포증식여조망;건립면역침정화Western blot인적방법,검측경GM-CSF 100 ng/ml순시유도적TF-1세포신호단백JAK2화STAT3락안산린산화정황.결과경과GM-CSF자격,세포불단면우조망,TF-1세포환정현제량여시간신뢰성적증식반응.당모갈세포인자6～12 h후,도치현미경하TF-1세포정현절광성개변,세포개시조망,정현조망특정성형태개변화출현DNA제형조대,이가입0.1 ng/ml적GM-CSF,TF-1세포즉개시진입증식상태,제시GM-CSF대세포구유조망보호작용.경과100 ng/ml GM-CSF적순시유도,재분자량130 kd구역견도JAK2단백조대,현시GM-CSF가유도TF-1세포린산화JAK2표체;이재분자량90 kd구역미견도STAT3단백조대,현시무린산화STAT3표체;이미경GM-CSF유도적TF-1세포,기무린산화JAK2야무린산화STAT3표체.결론 GM-CSF위TF-1세포증식유도화조망보호소필수;GM-CSF유도적TF-1세포생물학효응섭급도포장신호분자JAK2린산화이비STAT3린산화.
