上海交通大学学报
上海交通大學學報
상해교통대학학보
JOURNAL OF SHANGHAI JIAOTONG UNIVERSITY
2004年
5期
810-814,818
,共6页
王慧%林志新%孙庆申%吴立刚%范济华%许政暟
王慧%林誌新%孫慶申%吳立剛%範濟華%許政暟
왕혜%림지신%손경신%오립강%범제화%허정개
烟草花叶病毒%发夹核酶%绿色水母荧光蛋白%烟草原生质体%转染
煙草花葉病毒%髮夾覈酶%綠色水母熒光蛋白%煙草原生質體%轉染
연초화협병독%발협핵매%록색수모형광단백%연초원생질체%전염
研究一个烟草花叶病毒(TMV)cDNA3'末端被特异切割的发夹核酶对感染原生质体的作用.选用一个外源基因绿色水母荧光蛋白(GFPuv)作为报道基因,取代了大部分的CP编码区域,以研究在烟草原生质体中发夹核酶对TMV载体的复制,通过GFP的表达来确定表达量.顺式发夹核酶对T'MV载体感染效率的影响通过体外转录来观察.TMVGFPRIB体外转录感染原生质体的效率比与其不合该核酶的对应物的感染效率高3～5倍.Northern杂交结果表明,包括核酶在内的3'末端非病毒序列在体外转录反应开始后就被顺式发夹核酶切除了.当直接用载体DNA pST-MVGFPRIB感染原生质体时,感染原生质体的数量比与之相对应的pSTMVGFP NOS感染原生质体数多50%～80%.
研究一箇煙草花葉病毒(TMV)cDNA3'末耑被特異切割的髮夾覈酶對感染原生質體的作用.選用一箇外源基因綠色水母熒光蛋白(GFPuv)作為報道基因,取代瞭大部分的CP編碼區域,以研究在煙草原生質體中髮夾覈酶對TMV載體的複製,通過GFP的錶達來確定錶達量.順式髮夾覈酶對T'MV載體感染效率的影響通過體外轉錄來觀察.TMVGFPRIB體外轉錄感染原生質體的效率比與其不閤該覈酶的對應物的感染效率高3～5倍.Northern雜交結果錶明,包括覈酶在內的3'末耑非病毒序列在體外轉錄反應開始後就被順式髮夾覈酶切除瞭.噹直接用載體DNA pST-MVGFPRIB感染原生質體時,感染原生質體的數量比與之相對應的pSTMVGFP NOS感染原生質體數多50%～80%.
연구일개연초화협병독(TMV)cDNA3'말단피특이절할적발협핵매대감염원생질체적작용.선용일개외원기인록색수모형광단백(GFPuv)작위보도기인,취대료대부분적CP편마구역,이연구재연초원생질체중발협핵매대TMV재체적복제,통과GFP적표체래학정표체량.순식발협핵매대T'MV재체감염효솔적영향통과체외전록래관찰.TMVGFPRIB체외전록감염원생질체적효솔비여기불합해핵매적대응물적감염효솔고3～5배.Northern잡교결과표명,포괄핵매재내적3'말단비병독서렬재체외전록반응개시후취피순식발협핵매절제료.당직접용재체DNA pST-MVGFPRIB감염원생질체시,감염원생질체적수량비여지상대응적pSTMVGFP NOS감염원생질체수다50%～80%.
