上海交通大学学报（医学版）
上海交通大學學報（醫學版）
상해교통대학학보（의학판）
JOURNAL OF SHANGHAI JIAOTONG UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCE)
2006年
9期
1027-1031
,共5页
马睿%东山康仁%泉川公一%柳原克纪%宫崎义继%河野茂
馬睿%東山康仁%泉川公一%柳原剋紀%宮崎義繼%河野茂
마예%동산강인%천천공일%류원극기%궁기의계%하야무
假单胞菌喹诺酮信号%基因融合分析%基因敲除
假單胞菌喹諾酮信號%基因融閤分析%基因敲除
가단포균규낙동신호%기인융합분석%기인고제
目的 研究细胞间信息传递机制之一假单胞菌喹诺酮信号(PQS)在铜绿假单胞菌发病机制中的作用.方法 基于基因融合分析在转录研究中的实用性,构建了两种PQS相关对照质粒和整合突变株.一种是酶切质粒pYHP441获得pqsA'-lacZ片段后,亚克隆入质粒miniCTX-1中,构建成pqsA'的阳性表达质粒,随后将构建的质粒,通过双亲交配过程整合入野生型铜绿假单胞菌株PAO-1染色体组中;另一种是通过点特异插入诱变策略,将四环素基因盒插入启动子pqsD和pqsE之间,构建的阴性质粒转化入大肠杆菌S17-1株后,和上述pqsA'阳性表达突变株进行双亲交配过程.结果 针对今后PQS的相关研究,构建得到稳定表达PQS的质粒和阳性突变株作为阳性对照.构建获得pqsA-E启动子敲除质粒和相应PQS表达受阻的整合突变株作为阴性对照.结论 两种质粒和整合突变株的构建成功,使得PQS的相关研究结论具有客观性、精确性和有效性.
目的 研究細胞間信息傳遞機製之一假單胞菌喹諾酮信號(PQS)在銅綠假單胞菌髮病機製中的作用.方法 基于基因融閤分析在轉錄研究中的實用性,構建瞭兩種PQS相關對照質粒和整閤突變株.一種是酶切質粒pYHP441穫得pqsA'-lacZ片段後,亞剋隆入質粒miniCTX-1中,構建成pqsA'的暘性錶達質粒,隨後將構建的質粒,通過雙親交配過程整閤入野生型銅綠假單胞菌株PAO-1染色體組中;另一種是通過點特異插入誘變策略,將四環素基因盒插入啟動子pqsD和pqsE之間,構建的陰性質粒轉化入大腸桿菌S17-1株後,和上述pqsA'暘性錶達突變株進行雙親交配過程.結果 針對今後PQS的相關研究,構建得到穩定錶達PQS的質粒和暘性突變株作為暘性對照.構建穫得pqsA-E啟動子敲除質粒和相應PQS錶達受阻的整閤突變株作為陰性對照.結論 兩種質粒和整閤突變株的構建成功,使得PQS的相關研究結論具有客觀性、精確性和有效性.
목적 연구세포간신식전체궤제지일가단포균규낙동신호(PQS)재동록가단포균발병궤제중적작용.방법 기우기인융합분석재전록연구중적실용성,구건료량충PQS상관대조질립화정합돌변주.일충시매절질립pYHP441획득pqsA'-lacZ편단후,아극륭입질립miniCTX-1중,구건성pqsA'적양성표체질립,수후장구건적질립,통과쌍친교배과정정합입야생형동록가단포균주PAO-1염색체조중;령일충시통과점특이삽입유변책략,장사배소기인합삽입계동자pqsD화pqsE지간,구건적음성질립전화입대장간균S17-1주후,화상술pqsA'양성표체돌변주진행쌍친교배과정.결과 침대금후PQS적상관연구,구건득도은정표체PQS적질립화양성돌변주작위양성대조.구건획득pqsA-E계동자고제질립화상응PQS표체수조적정합돌변주작위음성대조.결론 량충질립화정합돌변주적구건성공,사득PQS적상관연구결론구유객관성、정학성화유효성.
