CAJ | 학술논문

用PCR技术和重叠延伸剪接技术获得牛分枝杆菌esat-6基因和mpb70-mpb83融合基因,连接真核表达载体pcDNA3.1(+),构建了重组质粒pCE6和pC70-83-E6.分4组免疫小鼠:pCE6组、pC70-83-E6组、pcDNA3.1(+)和PBS对照组,采用间接ELISA法检测免疫小鼠血清特异性抗体水平,MTT法检测免疫小鼠脾淋巴细胞增殖情况和IFN-γ分泌情况.结果表明,2重组质粒免疫组小鼠的血清抗体水平持续上升,而2对照组始终维持在较低水平,且pC70-83-E6组小鼠的抗体水平高于pCE6组.经PPD刺激后,pCE6组和pC70-83-E6组小鼠的SI值与2对照组均差异显著(P＜0.05),2重组质粒免疫组间差异不显著(P＞0.05);2重组质粒免疫小鼠脾细胞产生的IFN-γ均显著高于2对照组(P＜0.05),且pC70-83-E6组明显高于其他3组(P＜0.05).证实本试验构建的2种牛分枝杆菌DNA疫苗可有效诱导实验动物产生体液免疫和细胞免疫应答.
용PCR기술화중첩연신전접기술획득우분지간균esat-6기인화mpb70-mpb83융합기인,련접진핵표체재체pcDNA3.1(+),구건료중조질립pCE6화pC70-83-E6.분4조면역소서:pCE6조、pC70-83-E6조、pcDNA3.1(+)화PBS대조조,채용간접ELISA법검측면역소서혈청특이성항체수평,MTT법검측면역소서비림파세포증식정황화IFN-γ분비정황.결과표명,2중조질립면역조소서적혈청항체수평지속상승,이2대조조시종유지재교저수평,차pC70-83-E6조소서적항체수평고우pCE6조.경PPD자격후,pCE6조화pC70-83-E6조소서적SI치여2대조조균차이현저(P＜0.05),2중조질립면역조간차이불현저(P＞0.05);2중조질립면역소서비세포산생적IFN-γ균현저고우2대조조(P＜0.05),차pC70-83-E6조명현고우기타3조(P＜0.05).증실본시험구건적2충우분지간균DNA역묘가유효유도실험동물산생체액면역화세포면역응답.