上海交通大学学报（医学版）
上海交通大學學報（醫學版）
상해교통대학학보（의학판）
JOURNAL OF SHANGHAI JIAOTONG UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCE)
2007年
5期
546-551
,共6页
程时丹%王晓瑾%乔敏敏%周季兰%吴云林
程時丹%王曉瑾%喬敏敏%週季蘭%吳雲林
정시단%왕효근%교민민%주계란%오운림
Smad4%胃癌细胞株%质粒%增殖%凋亡
Smad4%胃癌細胞株%質粒%增殖%凋亡
Smad4%위암세포주%질립%증식%조망
目的 研究Smad4基因对人类胃癌细胞株细胞周期和细胞凋亡的影响,探讨其对人类胃癌细胞生长抑制的作用机制.方法 运用脂质体介导转染方法将Smad4基因导入其表达缺失的胃癌MKN28细胞株中,经G418筛选,获得稳定表达Smad4基因的Smad4+-MKN28细胞和作为对照的Smad4--MKN28细胞.体外培养亲本细胞、Smad4+-MKN28细胞和Smad4--MKN28细胞,各组细胞于第1、3、5、7天取三瓶细胞计数,计算平均值,并绘制生长曲线;细胞培养48 h后应用流式细胞仪检测细胞周期和凋亡率的改变;用RT-PCR和Western blotting方法检测细胞Bcl-2、Bax基因的mRNA和蛋白的表达.结果 稳定转染Smad4重组质粒的Smad4+-MKN28细胞较未转染的Smad4--MKN28细胞生长速度减慢(P＜0.05);流式细胞仪检测结果示Smad4+-MKN28细胞G0-G1期细胞百分数增加(P＜0.05),S期细胞百分数减少(P＜0.05),细胞凋亡增加(P＜0.05);RT-PCR结果示Smad4+-MKN28细胞Bax基因表达增加(P＜0.05),Bcl-2基因表达减少(P＜0.05),Western blotting结果示两者的编码蛋白也出现相应的变化.结论 恢复Smad4表达后细胞增殖减慢,凋亡增加,促凋亡基因表达上调,抑制凋亡基因表达下调,两者比值增大,从而使肿瘤细胞的生长受到抑制.
目的 研究Smad4基因對人類胃癌細胞株細胞週期和細胞凋亡的影響,探討其對人類胃癌細胞生長抑製的作用機製.方法 運用脂質體介導轉染方法將Smad4基因導入其錶達缺失的胃癌MKN28細胞株中,經G418篩選,穫得穩定錶達Smad4基因的Smad4+-MKN28細胞和作為對照的Smad4--MKN28細胞.體外培養親本細胞、Smad4+-MKN28細胞和Smad4--MKN28細胞,各組細胞于第1、3、5、7天取三瓶細胞計數,計算平均值,併繪製生長麯線;細胞培養48 h後應用流式細胞儀檢測細胞週期和凋亡率的改變;用RT-PCR和Western blotting方法檢測細胞Bcl-2、Bax基因的mRNA和蛋白的錶達.結果 穩定轉染Smad4重組質粒的Smad4+-MKN28細胞較未轉染的Smad4--MKN28細胞生長速度減慢(P＜0.05);流式細胞儀檢測結果示Smad4+-MKN28細胞G0-G1期細胞百分數增加(P＜0.05),S期細胞百分數減少(P＜0.05),細胞凋亡增加(P＜0.05);RT-PCR結果示Smad4+-MKN28細胞Bax基因錶達增加(P＜0.05),Bcl-2基因錶達減少(P＜0.05),Western blotting結果示兩者的編碼蛋白也齣現相應的變化.結論 恢複Smad4錶達後細胞增殖減慢,凋亡增加,促凋亡基因錶達上調,抑製凋亡基因錶達下調,兩者比值增大,從而使腫瘤細胞的生長受到抑製.
목적 연구Smad4기인대인류위암세포주세포주기화세포조망적영향,탐토기대인류위암세포생장억제적작용궤제.방법 운용지질체개도전염방법장Smad4기인도입기표체결실적위암MKN28세포주중,경G418사선,획득은정표체Smad4기인적Smad4+-MKN28세포화작위대조적Smad4--MKN28세포.체외배양친본세포、Smad4+-MKN28세포화Smad4--MKN28세포,각조세포우제1、3、5、7천취삼병세포계수,계산평균치,병회제생장곡선;세포배양48 h후응용류식세포의검측세포주기화조망솔적개변;용RT-PCR화Western blotting방법검측세포Bcl-2、Bax기인적mRNA화단백적표체.결과 은정전염Smad4중조질립적Smad4+-MKN28세포교미전염적Smad4--MKN28세포생장속도감만(P＜0.05);류식세포의검측결과시Smad4+-MKN28세포G0-G1기세포백분수증가(P＜0.05),S기세포백분수감소(P＜0.05),세포조망증가(P＜0.05);RT-PCR결과시Smad4+-MKN28세포Bax기인표체증가(P＜0.05),Bcl-2기인표체감소(P＜0.05),Western blotting결과시량자적편마단백야출현상응적변화.결론 회복Smad4표체후세포증식감만,조망증가,촉조망기인표체상조,억제조망기인표체하조,량자비치증대,종이사종류세포적생장수도억제.
