中国组织工程研究与临床康复
中國組織工程研究與臨床康複
중국조직공정연구여림상강복
JOURNAL OF CLINICAL REHABILITATIVE TISSUE ENGINEERING RESEARCH
2007年
19期
3661-3664
,共4页
杨旻
%戴先文%陶惠人%闫铭%胡蕴玉%李明全
楊旻
%戴先文%陶惠人%閆銘%鬍蘊玉%李明全
양민
%대선문%도혜인%염명%호온옥%리명전
核激活因子受体配体%RNA干预%破骨细胞
覈激活因子受體配體%RNA榦預%破骨細胞
핵격활인자수체배체%RNA간예%파골세포
目的:使用RNA干预来特异性减少核激活因子受体配体的表达从而抑制破骨细胞的形成.方法:实验于2005-01/2006-10在解放军第四军医大学全军骨科研究所完成.①构建由U6启动子引导产生小干预RNA的质粒载体mU6pro-dsRANKL.②按0.5,1.0,1.5,2.0,2.5,3.0μg的梯度将质粒mU6pro-dsRANKL及对照质粒mU6pro转染大鼠骨髓基质细胞,48 h后提取细胞总RNA.③采用Northern blot法检测,以核激活因子受体配体与内参β-肌动蛋白扩增产物的吸光度比值来反映核激活因子受体配体mRNA的表达情况.④再将质粒mU6pro-dsRANKL按0,1.0,2,3μg转染破骨细胞,抗酒石酸染色显微镜下观察.结果:①Northern blot结果:显示转染骨髓基质细胞后细胞中核激活因子受体配体mRNA的表达量随着质粒载体量的增加而减少.②破骨细胞抗酒石酸染色显示:破骨细胞的数量也随着质粒载体量的增加而减少.结论:U6启动子引导产生小干预RNA的质粒载体能有效的减低核激活因子受体配体的表达从而抑制破骨细胞的形成.
目的:使用RNA榦預來特異性減少覈激活因子受體配體的錶達從而抑製破骨細胞的形成.方法:實驗于2005-01/2006-10在解放軍第四軍醫大學全軍骨科研究所完成.①構建由U6啟動子引導產生小榦預RNA的質粒載體mU6pro-dsRANKL.②按0.5,1.0,1.5,2.0,2.5,3.0μg的梯度將質粒mU6pro-dsRANKL及對照質粒mU6pro轉染大鼠骨髓基質細胞,48 h後提取細胞總RNA.③採用Northern blot法檢測,以覈激活因子受體配體與內參β-肌動蛋白擴增產物的吸光度比值來反映覈激活因子受體配體mRNA的錶達情況.④再將質粒mU6pro-dsRANKL按0,1.0,2,3μg轉染破骨細胞,抗酒石痠染色顯微鏡下觀察.結果:①Northern blot結果:顯示轉染骨髓基質細胞後細胞中覈激活因子受體配體mRNA的錶達量隨著質粒載體量的增加而減少.②破骨細胞抗酒石痠染色顯示:破骨細胞的數量也隨著質粒載體量的增加而減少.結論:U6啟動子引導產生小榦預RNA的質粒載體能有效的減低覈激活因子受體配體的錶達從而抑製破骨細胞的形成.
목적:사용RNA간예래특이성감소핵격활인자수체배체적표체종이억제파골세포적형성.방법:실험우2005-01/2006-10재해방군제사군의대학전군골과연구소완성.①구건유U6계동자인도산생소간예RNA적질립재체mU6pro-dsRANKL.②안0.5,1.0,1.5,2.0,2.5,3.0μg적제도장질립mU6pro-dsRANKL급대조질립mU6pro전염대서골수기질세포,48 h후제취세포총RNA.③채용Northern blot법검측,이핵격활인자수체배체여내삼β-기동단백확증산물적흡광도비치래반영핵격활인자수체배체mRNA적표체정황.④재장질립mU6pro-dsRANKL안0,1.0,2,3μg전염파골세포,항주석산염색현미경하관찰.결과:①Northern blot결과:현시전염골수기질세포후세포중핵격활인자수체배체mRNA적표체량수착질립재체량적증가이감소.②파골세포항주석산염색현시:파골세포적수량야수착질립재체량적증가이감소.결론:U6계동자인도산생소간예RNA적질립재체능유효적감저핵격활인자수체배체적표체종이억제파골세포적형성.
