中国预防兽医学报
中國預防獸醫學報
중국예방수의학보
CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE
2007年
6期
405-409
,共5页
沈国顺%金宁一%庄天中%韩贞珍%李阳%张金双
瀋國順%金寧一%莊天中%韓貞珍%李暘%張金雙
침국순%금저일%장천중%한정진%리양%장금쌍
PRRSV ORF5%PCV-2 ORF2%鸡痘病毒
PRRSV ORF5%PCV-2 ORF2%鷄痘病毒
PRRSV ORF5%PCV-2 ORF2%계두병독
分别将猪圆环病毒2型的ORF2基因和猪繁殖与呼吸综合征病毒的ORF5基因,插入到鸡痘病毒转移载体pUTA2-16-LacZ单一启动子和复合启动子下游,构建重组鸡痘病毒转移质粒pUTAL-ORF5-ORF2.将该重组质粒与鸡痘病毒282-E4株共转染鸡胚成纤维细胞,进行同源重组.通过3次溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)加压筛选,经RT-PCR、IFA和Western blot鉴定,表明重组鸡痘病毒中的目的基因在鸡胚成纤维细胞中得到表达,获得一株携带有目的基因ORF2和ORF5的重组鸡痘病毒rFPV-ORF2-ORF5.
分彆將豬圓環病毒2型的ORF2基因和豬繁殖與呼吸綜閤徵病毒的ORF5基因,插入到鷄痘病毒轉移載體pUTA2-16-LacZ單一啟動子和複閤啟動子下遊,構建重組鷄痘病毒轉移質粒pUTAL-ORF5-ORF2.將該重組質粒與鷄痘病毒282-E4株共轉染鷄胚成纖維細胞,進行同源重組.通過3次溴脫氧尿嘧啶覈苷(BrdU)加壓篩選,經RT-PCR、IFA和Western blot鑒定,錶明重組鷄痘病毒中的目的基因在鷄胚成纖維細胞中得到錶達,穫得一株攜帶有目的基因ORF2和ORF5的重組鷄痘病毒rFPV-ORF2-ORF5.
분별장저원배병독2형적ORF2기인화저번식여호흡종합정병독적ORF5기인,삽입도계두병독전이재체pUTA2-16-LacZ단일계동자화복합계동자하유,구건중조계두병독전이질립pUTAL-ORF5-ORF2.장해중조질립여계두병독282-E4주공전염계배성섬유세포,진행동원중조.통과3차추탈양뇨밀정핵감(BrdU)가압사선,경RT-PCR、IFA화Western blot감정,표명중조계두병독중적목적기인재계배성섬유세포중득도표체,획득일주휴대유목적기인ORF2화ORF5적중조계두병독rFPV-ORF2-ORF5.
