海洋环境科学
海洋環境科學
해양배경과학
MARINE ENVIRONMENTAL SCIENCE
2008年
1期
67-70,82
,共5页
王靖%徐虹%李珣%郑锦乾%王立红
王靖%徐虹%李珣%鄭錦乾%王立紅
왕정%서홍%리순%정금건%왕립홍
铜绿微囊藻%钟蛋白KaiC%酵母双杂交
銅綠微囊藻%鐘蛋白KaiC%酵母雙雜交
동록미낭조%종단백KaiC%효모쌍잡교
通过PCR扩增了铜绿微囊藻的生物钟主控基因KaiC,并将其分别克隆到酵母双杂交系统的诱饵质粒pGBKT7和猎物质粒pGADT7中,然后将重组质粒pGBKT7-kaiC/pGADT7- kaiC和pGBKT7-kaiC/pGADT7分别共转化酵母菌AH109,经营养缺陷生长和β-半乳糖苷酶印迹检测表明,KaiC蛋白不具有毒性不会影响酵母细胞的生长,也不具有自激活活性,不会激活报告基因的表达,并且KaiC蛋白自身存在较强的相互作用.诱饵质粒pGBKT7-kaiC可用于从基因组文库中筛选KaiC的相互作用蛋白.
通過PCR擴增瞭銅綠微囊藻的生物鐘主控基因KaiC,併將其分彆剋隆到酵母雙雜交繫統的誘餌質粒pGBKT7和獵物質粒pGADT7中,然後將重組質粒pGBKT7-kaiC/pGADT7- kaiC和pGBKT7-kaiC/pGADT7分彆共轉化酵母菌AH109,經營養缺陷生長和β-半乳糖苷酶印跡檢測錶明,KaiC蛋白不具有毒性不會影響酵母細胞的生長,也不具有自激活活性,不會激活報告基因的錶達,併且KaiC蛋白自身存在較彊的相互作用.誘餌質粒pGBKT7-kaiC可用于從基因組文庫中篩選KaiC的相互作用蛋白.
통과PCR확증료동록미낭조적생물종주공기인KaiC,병장기분별극륭도효모쌍잡교계통적유이질립pGBKT7화작물질립pGADT7중,연후장중조질립pGBKT7-kaiC/pGADT7- kaiC화pGBKT7-kaiC/pGADT7분별공전화효모균AH109,경영양결함생장화β-반유당감매인적검측표명,KaiC단백불구유독성불회영향효모세포적생장,야불구유자격활활성,불회격활보고기인적표체,병차KaiC단백자신존재교강적상호작용.유이질립pGBKT7-kaiC가용우종기인조문고중사선KaiC적상호작용단백.
