中国畜牧兽医
中國畜牧獸醫
중국축목수의
CHINA ANIMAL HUSBANDRY & VETERINARY MEDICINE
2010年
3期
78-83
,共6页
高艳%杨松沛%雷小文%岳华%李明义%汤承
高豔%楊鬆沛%雷小文%嶽華%李明義%湯承
고염%양송패%뢰소문%악화%리명의%탕승
β-干扰素%荧光定量RT-PCR%禽流感病毒%新城疫病毒%鸡胚成纤维细胞
β-榦擾素%熒光定量RT-PCR%禽流感病毒%新城疫病毒%鷄胚成纖維細胞
β-간우소%형광정량RT-PCR%금류감병독%신성역병독%계배성섬유세포
根据鸡β-干扰素(ChIFN-β)基因保守序列设计引物建立了检测鸡IFN-β Mrna表达水平的荧光定量RT-PCR(RRT-PCR)方法,并对H5N1亚型禽流感病毒(AIV)和新城疫病毒强毒株(Vndv)感染后3、6、12、24、30 h的鸡胚成纤维细胞(CEF)中IFN-p Mrna表达水平进行了检测.结果显示,建立的RRT-PCR特异性好,对鸡IFN-p Mrna的扩增效率为94.18%,线性范围为10-8～10-3,相关系数为0.992,最低能检出48拷贝/反应.AIV在感染CEF后6、12 h显著抑制IFN-βmRNA的表达,24 h开始诱导IFN-β Mrna表达,30 h时IFN-β Mrna水平显著升高;Vndv在感染CEF后的24 h内显著抑制IFN-β Mrna的表达,30 h时则显著诱导IFN-β Mrna表达.本试验结果为进一步研究H5N1和NDV与机体的相互作用提供了有价值的信息.
根據鷄β-榦擾素(ChIFN-β)基因保守序列設計引物建立瞭檢測鷄IFN-β Mrna錶達水平的熒光定量RT-PCR(RRT-PCR)方法,併對H5N1亞型禽流感病毒(AIV)和新城疫病毒彊毒株(Vndv)感染後3、6、12、24、30 h的鷄胚成纖維細胞(CEF)中IFN-p Mrna錶達水平進行瞭檢測.結果顯示,建立的RRT-PCR特異性好,對鷄IFN-p Mrna的擴增效率為94.18%,線性範圍為10-8～10-3,相關繫數為0.992,最低能檢齣48拷貝/反應.AIV在感染CEF後6、12 h顯著抑製IFN-βmRNA的錶達,24 h開始誘導IFN-β Mrna錶達,30 h時IFN-β Mrna水平顯著升高;Vndv在感染CEF後的24 h內顯著抑製IFN-β Mrna的錶達,30 h時則顯著誘導IFN-β Mrna錶達.本試驗結果為進一步研究H5N1和NDV與機體的相互作用提供瞭有價值的信息.
근거계β-간우소(ChIFN-β)기인보수서렬설계인물건립료검측계IFN-β Mrna표체수평적형광정량RT-PCR(RRT-PCR)방법,병대H5N1아형금류감병독(AIV)화신성역병독강독주(Vndv)감염후3、6、12、24、30 h적계배성섬유세포(CEF)중IFN-p Mrna표체수평진행료검측.결과현시,건립적RRT-PCR특이성호,대계IFN-p Mrna적확증효솔위94.18%,선성범위위10-8～10-3,상관계수위0.992,최저능검출48고패/반응.AIV재감염CEF후6、12 h현저억제IFN-βmRNA적표체,24 h개시유도IFN-β Mrna표체,30 h시IFN-β Mrna수평현저승고;Vndv재감염CEF후적24 h내현저억제IFN-β Mrna적표체,30 h시칙현저유도IFN-β Mrna표체.본시험결과위진일보연구H5N1화NDV여궤체적상호작용제공료유개치적신식.
