广西农业科学
廣西農業科學
엄서농업과학
GUANGXI AGRICULTURAL SCIENCES
2010年
3期
223-225
,共3页
秦碧霞%蔡健和%莫磊兴%魏源文%刘志明%朱桂宁%陆秀红
秦碧霞%蔡健和%莫磊興%魏源文%劉誌明%硃桂寧%陸秀紅
진벽하%채건화%막뢰흥%위원문%류지명%주계저%륙수홍
黑皮果蔗%果蔗花叶病毒%PCR鉴定
黑皮果蔗%果蔗花葉病毒%PCR鑒定
흑피과자%과자화협병독%PCR감정
在南宁市郊采集到l份表现褪绿条纹、花叶的黑皮果蔗样品(NN-Ba2),经差速离心和PEG二次沉淀法提取病毒粗汁液,在电镜下观察到略弯曲的线状病毒粒子;DAC-ELISA检测显示NN-Ba2与甘蔗花叶病毒多克隆抗体和单克隆抗体呈阳性反应;根据SCMV和SrMV CP基因分别设计合成特异引物,利用RT-PCR对NN-Ba2进行分子鉴定,扩增出大小约900 bp的预期片段,健康对照未扩增到任何片段;NN-Ba2扩增片段经克隆后测序得到719个有效核苷酸,测序结果在DDBJ上用BLAST进行同源性分析,结果显示该序列与已报道的SCMV广东、云南、广西等地分离物对应的核苷酸序列同源性为97.36%～97.77%,根据马铃薯Y病毒科(Potyviridae)病毒种和株系的划分标准,NN-Ba2鉴定为SCMV.田间采集的另外10份表现花叶症状的果蔗样品经ELISA和RT-PCR检测,证明也感染了SCMV.
在南寧市郊採集到l份錶現褪綠條紋、花葉的黑皮果蔗樣品(NN-Ba2),經差速離心和PEG二次沉澱法提取病毒粗汁液,在電鏡下觀察到略彎麯的線狀病毒粒子;DAC-ELISA檢測顯示NN-Ba2與甘蔗花葉病毒多剋隆抗體和單剋隆抗體呈暘性反應;根據SCMV和SrMV CP基因分彆設計閤成特異引物,利用RT-PCR對NN-Ba2進行分子鑒定,擴增齣大小約900 bp的預期片段,健康對照未擴增到任何片段;NN-Ba2擴增片段經剋隆後測序得到719箇有效覈苷痠,測序結果在DDBJ上用BLAST進行同源性分析,結果顯示該序列與已報道的SCMV廣東、雲南、廣西等地分離物對應的覈苷痠序列同源性為97.36%～97.77%,根據馬鈴藷Y病毒科(Potyviridae)病毒種和株繫的劃分標準,NN-Ba2鑒定為SCMV.田間採集的另外10份錶現花葉癥狀的果蔗樣品經ELISA和RT-PCR檢測,證明也感染瞭SCMV.
재남저시교채집도l빈표현퇴록조문、화협적흑피과자양품(NN-Ba2),경차속리심화PEG이차침정법제취병독조즙액,재전경하관찰도략만곡적선상병독입자;DAC-ELISA검측현시NN-Ba2여감자화협병독다극륭항체화단극륭항체정양성반응;근거SCMV화SrMV CP기인분별설계합성특이인물,이용RT-PCR대NN-Ba2진행분자감정,확증출대소약900 bp적예기편단,건강대조미확증도임하편단;NN-Ba2확증편단경극륭후측서득도719개유효핵감산,측서결과재DDBJ상용BLAST진행동원성분석,결과현시해서렬여이보도적SCMV엄동、운남、엄서등지분리물대응적핵감산서렬동원성위97.36%～97.77%,근거마령서Y병독과(Potyviridae)병독충화주계적화분표준,NN-Ba2감정위SCMV.전간채집적령외10빈표현화협증상적과자양품경ELISA화RT-PCR검측,증명야감염료SCMV.
