生物技术通报
生物技術通報
생물기술통보
BIOTECHNOLOGY BULLETIN
2011年
4期
186-192
,共7页
黄仕杰%陈平%陈晓阳%辛燕花%郭丽琼%林俊芳
黃仕傑%陳平%陳曉暘%辛燕花%郭麗瓊%林俊芳
황사걸%진평%진효양%신연화%곽려경%림준방
蔓地亚红豆杉%紫杉醇%紫杉烷2α-羟基化酶%基因克隆%生物信息学
蔓地亞紅豆杉%紫杉醇%紫杉烷2α-羥基化酶%基因剋隆%生物信息學
만지아홍두삼%자삼순%자삼완2α-간기화매%기인극륭%생물신식학
紫杉烷2α-羟基化酶是形成紫杉醇核心骨架的羟基化反应关键酶之一,以taxusin作为底物进行氧化生成2α,7β-dihydroxytaxusin.利用蔓地亚红豆杉的总DNA为模板,采用PCR技术克隆出紫杉烷2α-羟基化酶的DNA序列,利用在线比对和生物学软件分析其内含子,采用外显子拼接法克隆出紫杉烷2α-羟基化酶基因的cDNA序列.测序结果表明该基因含有1个1 488 bp的开放阅读框,编码495个氨基酸的多肽;同源性比较分析结果表明,其碱基序列及氨基酸序列与已经报道的加拿大红豆杉的紫杉烷2α-羟基化酶基因的一致性为分别为98%和89%.利用SWISS-PROT、DNAMAN等生物信息学工具对其列进行了序列分析,为利用代谢工程的方法生产紫杉醇或其前体物质提供了分子基础.
紫杉烷2α-羥基化酶是形成紫杉醇覈心骨架的羥基化反應關鍵酶之一,以taxusin作為底物進行氧化生成2α,7β-dihydroxytaxusin.利用蔓地亞紅豆杉的總DNA為模闆,採用PCR技術剋隆齣紫杉烷2α-羥基化酶的DNA序列,利用在線比對和生物學軟件分析其內含子,採用外顯子拼接法剋隆齣紫杉烷2α-羥基化酶基因的cDNA序列.測序結果錶明該基因含有1箇1 488 bp的開放閱讀框,編碼495箇氨基痠的多肽;同源性比較分析結果錶明,其堿基序列及氨基痠序列與已經報道的加拿大紅豆杉的紫杉烷2α-羥基化酶基因的一緻性為分彆為98%和89%.利用SWISS-PROT、DNAMAN等生物信息學工具對其列進行瞭序列分析,為利用代謝工程的方法生產紫杉醇或其前體物質提供瞭分子基礎.
자삼완2α-간기화매시형성자삼순핵심골가적간기화반응관건매지일,이taxusin작위저물진행양화생성2α,7β-dihydroxytaxusin.이용만지아홍두삼적총DNA위모판,채용PCR기술극륭출자삼완2α-간기화매적DNA서렬,이용재선비대화생물학연건분석기내함자,채용외현자병접법극륭출자삼완2α-간기화매기인적cDNA서렬.측서결과표명해기인함유1개1 488 bp적개방열독광,편마495개안기산적다태;동원성비교분석결과표명,기감기서렬급안기산서렬여이경보도적가나대홍두삼적자삼완2α-간기화매기인적일치성위분별위98%화89%.이용SWISS-PROT、DNAMAN등생물신식학공구대기렬진행료서렬분석,위이용대사공정적방법생산자삼순혹기전체물질제공료분자기출.
