CAJ | 학술논문

目的表达纯化肠道病毒71型(EV71)VP1蛋白,初步建立人血清中抗EV71 IgG间接ELISA检测方法.方法通过化学法合成肠道病毒71型VP1全基因序列,构建重组质粒pET-43.1a(+)/VP1,转化大肠杆菌BL21(DE)3,IPTG诱导表达,镍金属亲和层析纯化目的蛋白,产物经SDS-PAGE和Western blot鉴定.以目的蛋白作为包被抗原,初步建立间接ELISA检测方法,并对77份6～10岁无手足口病症状儿童血清及手足口病现症患儿血清进行检测.结果成功构建重组质粒pET-43.1a(+)/VP1,VP1融合蛋白分子量约为43 kD,纯度可达95%;初步建立了人血清中抗EV71 IgG间接ELISA 检测方法,36例HFMD现症患儿中EV71 IgG阳性22例(61.11%);41例无手足口症状儿童血清中 EV71 IgG阳性21 例(51.22%).结论表达产物具有较好的免疫原性,可用于肠道病毒71抗体检测.
목적 표체순화장도병독71형(EV71)VP1단백,초보건립인혈청중항EV71 IgG간접ELISA검측방법.방법 통과화학법합성장도병독71형VP1전기인서렬,구건중조질립pET-43.1a(+)/VP1,전화대장간균BL21(DE)3,IPTG유도표체,얼금속친화층석순화목적단백,산물경SDS-PAGE화Western blot감정.이목적단백작위포피항원,초보건립간접ELISA검측방법,병대77빈6～10세무수족구병증상인동혈청급수족구병현증환인혈청진행검측.결과 성공구건중조질립pET-43.1a(+)/VP1,VP1융합단백분자량약위43 kD,순도가체95%;초보건립료인혈청중항EV71 IgG간접ELISA 검측방법,36례HFMD현증환인중EV71 IgG양성22례(61.11%);41례무수족구증상인동혈청중 EV71 IgG양성21 례(51.22%).결론 표체산물구유교호적면역원성,가용우장도병독71항체검측.