胰腺癌相关自身抗原47原核表达、纯化及其抗体检测胰腺癌的价值初探
이선암상관자신항원47원핵표체、순화급기항체검측이선암적개치초탐
cDNA cloning, expression of PAA47 and its significance in pancreatic cancer
  • 万方数据
    中华检验医学杂志 중화검험의학잡지
    CHINESE JOURNAL OF LABORATORY MEDICINE
    2003年 4期 222-225 ,共4页

    夏晴%仲人前%邓安梅%范列英%韩焕新%周晔%陈军%侯晓菁%陈燕%孔宪涛

    하청%중인전%산안매%범렬영%한환신%주엽%진군%후효정%진연%공헌도

    胰腺癌%自身抗体%基因克隆%基因表达%免疫印迹法 胰腺癌%自身抗體%基因剋隆%基因錶達%免疫印跡法
    이선암%자신항체%기인극륭%기인표체%면역인적법
    目的验证胰腺癌相关性自身抗原47(PAA47)的质谱鉴定结果,初探抗PAA47检测在诊断胰腺癌中的意义.方法构建pQE-30-PAA47重组表达载体;在大肠杆菌M15中诱导表达KIAA0111编码蛋白质;经纯化后用点印迹、免疫印证法验证表达产物与相应胰腺癌相关性自身抗体阳性血清的抗原反应性;建立间接酶联免疫吸附实验(ELISA),检测60名健康体检者、60例胰腺癌、20例慢性胰腺炎及120例其他肿瘤(大肠癌、肝癌、胃癌及肺癌各30例)患者血清中的抗PAA47,并与回顾性糖链抗原19-9(CA19-9)检测结果相比较.结果表达产物的序列与KIAA0111编码序列一致;点印迹法和免疫印迹法显示纯化表达产物与抗PAA47血清具有抗原反应性.ELISA结果显示,胰腺癌患者中,该抗体阳性率为31.67%(19/60),大肠癌、肝癌、胃癌分别为10.00%、3.33%、6.67%,正常人、慢性胰腺炎及肺癌患者中未见阳性.抗PAA47对胰腺癌的灵敏度为31.67%,特异性为95.89%.与慢性胰腺炎患者比较,PAA47的灵敏度为31.67%,特异性为100%,CA19-9的灵敏度为75.00%,特异性为86.96%.平行法联合检测2项指标,既保持了相同的特异性,又提高了检测的灵敏度(90%,P<0.05).采用顺序法联合检测,灵敏度和特异性分别为70%和100%.结论本研究成功克隆了人KIAA0111编码基因,并将其在大肠杆菌中成功表达;新鉴定的PAA47,其抗体血清学检测与CA19-9等肿瘤标志物联合,对提高胰腺癌诊断的灵敏度和特异性具有一定的意义.
    목적험증이선암상관성자신항원47(PAA47)적질보감정결과,초탐항PAA47검측재진단이선암중적의의.방법구건pQE-30-PAA47중조표체재체;재대장간균M15중유도표체KIAA0111편마단백질;경순화후용점인적、면역인증법험증표체산물여상응이선암상관성자신항체양성혈청적항원반응성;건립간접매련면역흡부실험(ELISA),검측60명건강체검자、60례이선암、20례만성이선염급120례기타종류(대장암、간암、위암급폐암각30례)환자혈청중적항PAA47,병여회고성당련항원19-9(CA19-9)검측결과상비교.결과표체산물적서렬여KIAA0111편마서렬일치;점인적법화면역인적법현시순화표체산물여항PAA47혈청구유항원반응성.ELISA결과현시,이선암환자중,해항체양성솔위31.67%(19/60),대장암、간암、위암분별위10.00%、3.33%、6.67%,정상인、만성이선염급폐암환자중미견양성.항PAA47대이선암적령민도위31.67%,특이성위95.89%.여만성이선염환자비교,PAA47적령민도위31.67%,특이성위100%,CA19-9적령민도위75.00%,특이성위86.96%.평행법연합검측2항지표,기보지료상동적특이성,우제고료검측적령민도(90%,P<0.05).채용순서법연합검측,령민도화특이성분별위70%화100%.결론본연구성공극륭료인KIAA0111편마기인,병장기재대장간균중성공표체;신감정적PAA47,기항체혈청학검측여CA19-9등종류표지물연합,대제고이선암진단적령민도화특이성구유일정적의의.
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