解放军医学杂志
解放軍醫學雜誌
해방군의학잡지
MEDICAL JOURNAL OF CHINESE PEOPLE'S LIBERATION ARMY
2008年
4期
388-390
,共3页
师雷锋%高春芳%徐迪辉%王继德
師雷鋒%高春芳%徐迪輝%王繼德
사뢰봉%고춘방%서적휘%왕계덕
XAF1%干扰素调节因子-1%点突变
XAF1%榦擾素調節因子-1%點突變
XAF1%간우소조절인자-1%점돌변
目的 在XAF1的转录起始序列中鉴定一具有高度活性的IRF-1作用元件.方法 通过生物信息学分析发现XAF1转录起始处(-30～-38nt)有一潜在的干扰素(IFN)调节因子1结合元件(IRF-E),与同义IRF-E序列同源性达76.2%,命名为IRFE-XAF1.应用凝胶电泳迁移实验(EMSA)检测IRFE-XAF1的核蛋白结合活性,并分别定点突变其核心序列内-34nt和序列旁-28nt,检测突变后XAF1启动子活性变化及对IFN-α作用的影响.结果 EMSA实验发现32P标记的含IRFE-XAF1的双链寡核苷酸DNA探针可与细胞核蛋白结合,且可被IRF-E同义探针阻断,定点突变后结合活性丧失,证实该IRFE-XAF1位点具有与转录因子结合的活性.含该IRFE-XAF1位点的XAF1启动子序列具有启动子活性且可被IFN-α诱导,IRFE-XAF1序列定点突变后启动子活性明显降低,其中-34nt突变后完全消除了IFN-α上调启动子活性的作用.结论 XAF1的转录起始序列具有一高度活性的IRF-E,其序列为-38nt GAAACGAAA-30nt,这一发现提示XAF1是IFN-α诱导肿瘤细胞分化的作用基因.
目的 在XAF1的轉錄起始序列中鑒定一具有高度活性的IRF-1作用元件.方法 通過生物信息學分析髮現XAF1轉錄起始處(-30～-38nt)有一潛在的榦擾素(IFN)調節因子1結閤元件(IRF-E),與同義IRF-E序列同源性達76.2%,命名為IRFE-XAF1.應用凝膠電泳遷移實驗(EMSA)檢測IRFE-XAF1的覈蛋白結閤活性,併分彆定點突變其覈心序列內-34nt和序列徬-28nt,檢測突變後XAF1啟動子活性變化及對IFN-α作用的影響.結果 EMSA實驗髮現32P標記的含IRFE-XAF1的雙鏈寡覈苷痠DNA探針可與細胞覈蛋白結閤,且可被IRF-E同義探針阻斷,定點突變後結閤活性喪失,證實該IRFE-XAF1位點具有與轉錄因子結閤的活性.含該IRFE-XAF1位點的XAF1啟動子序列具有啟動子活性且可被IFN-α誘導,IRFE-XAF1序列定點突變後啟動子活性明顯降低,其中-34nt突變後完全消除瞭IFN-α上調啟動子活性的作用.結論 XAF1的轉錄起始序列具有一高度活性的IRF-E,其序列為-38nt GAAACGAAA-30nt,這一髮現提示XAF1是IFN-α誘導腫瘤細胞分化的作用基因.
목적 재XAF1적전록기시서렬중감정일구유고도활성적IRF-1작용원건.방법 통과생물신식학분석발현XAF1전록기시처(-30～-38nt)유일잠재적간우소(IFN)조절인자1결합원건(IRF-E),여동의IRF-E서렬동원성체76.2%,명명위IRFE-XAF1.응용응효전영천이실험(EMSA)검측IRFE-XAF1적핵단백결합활성,병분별정점돌변기핵심서렬내-34nt화서렬방-28nt,검측돌변후XAF1계동자활성변화급대IFN-α작용적영향.결과 EMSA실험발현32P표기적함IRFE-XAF1적쌍련과핵감산DNA탐침가여세포핵단백결합,차가피IRF-E동의탐침조단,정점돌변후결합활성상실,증실해IRFE-XAF1위점구유여전록인자결합적활성.함해IRFE-XAF1위점적XAF1계동자서렬구유계동자활성차가피IFN-α유도,IRFE-XAF1서렬정점돌변후계동자활성명현강저,기중-34nt돌변후완전소제료IFN-α상조계동자활성적작용.결론 XAF1적전록기시서렬구유일고도활성적IRF-E,기서렬위-38nt GAAACGAAA-30nt,저일발현제시XAF1시IFN-α유도종류세포분화적작용기인.
