CAJ | 학술논문

本研究探讨异硫氰酸苯己酯对p16基因高甲基化的多发性骨髓瘤U266细胞株是否有去甲基化的作用.用异硫氰酸苯己酯0、5、10 μmol/L孵育U266细胞株,提取DNA备用.用亚硫酸氢盐处理正常人基因组DNA,并以此为模板进行PCR扩增.设计1组特殊荧光标记探针以构建1种检测p16基因启动子区3个CpG位点甲基化改变的芯片,特殊荧光标记探针包括1对非甲基化探针和甲基化探针,检测相邻的3个CpG位点甲基化的程度.采用基因芯片的方法,将完全未甲基化的DNA和完全甲基化的DNA混合后制成标准曲线,将U266细胞株样本处理后点在芯片上与标准曲线进行比较后得出定量检测的结果.结果表明:芯片上探针的可重复性和精确性很好,0、5、10 μmol/L异硫氰酸苯己酯处理后的U266细胞株p16基因的甲基化程度分别为78.2%、61.7%、54.8%.结论:异硫氰酸苯己酯可以降低U266细胞株p16基因甲基化的程度.
본연구탐토이류청산분기지대p16기인고갑기화적다발성골수류U266세포주시부유거갑기화적작용.용이류청산분기지0、5、10 μmol/L부육U266세포주,제취DNA비용.용아류산경염처리정상인기인조DNA,병이차위모판진행PCR확증.설계1조특수형광표기탐침이구건1충검측p16기인계동자구3개CpG위점갑기화개변적심편,특수형광표기탐침포괄1대비갑기화탐침화갑기화탐침,검측상린적3개CpG위점갑기화적정도.채용기인심편적방법,장완전미갑기화적DNA화완전갑기화적DNA혼합후제성표준곡선,장U266세포주양본처리후점재심편상여표준곡선진행비교후득출정량검측적결과.결과표명:심편상탐침적가중복성화정학성흔호,0、5、10 μmol/L이류청산분기지처리후적U266세포주p16기인적갑기화정도분별위78.2%、61.7%、54.8%.결론:이류청산분기지가이강저U266세포주p16기인갑기화적정도.