复旦学报（医学版）
複旦學報（醫學版）
복단학보（의학판）
FUDAN UNIVERSITY JOURNAL OF MEDICAL SCIENCES
2010年
1期
59-62,67
,共5页
周超群%史训龙%李继扬%周珮
週超群%史訓龍%李繼颺%週珮
주초군%사훈룡%리계양%주패
人参皂苷Rd%生物转化%菌株特性%底物耐受%拟青霉菌sp229-7
人參皂苷Rd%生物轉化%菌株特性%底物耐受%擬青黴菌sp229-7
인삼조감Rd%생물전화%균주특성%저물내수%의청매균sp229-7
ginsenoside Rd%biotransformation%strain characteristics%substrate tolerance%Paecilomyces bainier sp229-7
目的 通过研究突变株拟青霉菌sp229-7(Paecilomyces bainier sp229-7)的生长及转化底物情况,探讨突变株转化三七茎叶总皂苷的高效性.方法 在不同条件下,运用摇瓶转化法考查菌株生长和转化底物特性;分别采用静息态细胞、胞外酶以及粗酶液,测定其对底物转化情况.结果 菌体12～48 h之间生长最旺盛,36 h加入底物转化率最高,加入底物后72 h转化基本结束,转化产物只有人参皂苷Rd,底物投料量至少可以达到20 mg/mL,克分子转化率达80%以上,转化温度27 ℃～32 ℃之间最佳.静息态细胞、胞外酶以及粗酶液都可以将人参皂苷Rb1转化为人参皂苷Rd.结论 与文献报道相比,Paecilomyces bainier sp229-7突变株具有良好的底物耐受性和专一性,快速生长的后期是底物投料的最佳时机,Rb1 转化为Rd 的时间缩短为3 d,投料量至少增加20倍,显著提高了转化效率,可望应用于工业生产.突变株的高转化效率可能与转化酶由细胞内产生并部分分泌到胞外有关,增加了酶与底物接触机会,避免了产物在胞内过量积累.
目的 通過研究突變株擬青黴菌sp229-7(Paecilomyces bainier sp229-7)的生長及轉化底物情況,探討突變株轉化三七莖葉總皂苷的高效性.方法 在不同條件下,運用搖瓶轉化法攷查菌株生長和轉化底物特性;分彆採用靜息態細胞、胞外酶以及粗酶液,測定其對底物轉化情況.結果 菌體12～48 h之間生長最旺盛,36 h加入底物轉化率最高,加入底物後72 h轉化基本結束,轉化產物隻有人參皂苷Rd,底物投料量至少可以達到20 mg/mL,剋分子轉化率達80%以上,轉化溫度27 ℃～32 ℃之間最佳.靜息態細胞、胞外酶以及粗酶液都可以將人參皂苷Rb1轉化為人參皂苷Rd.結論 與文獻報道相比,Paecilomyces bainier sp229-7突變株具有良好的底物耐受性和專一性,快速生長的後期是底物投料的最佳時機,Rb1 轉化為Rd 的時間縮短為3 d,投料量至少增加20倍,顯著提高瞭轉化效率,可望應用于工業生產.突變株的高轉化效率可能與轉化酶由細胞內產生併部分分泌到胞外有關,增加瞭酶與底物接觸機會,避免瞭產物在胞內過量積纍.
목적 통과연구돌변주의청매균sp229-7(Paecilomyces bainier sp229-7)적생장급전화저물정황,탐토돌변주전화삼칠경협총조감적고효성.방법 재불동조건하,운용요병전화법고사균주생장화전화저물특성;분별채용정식태세포、포외매이급조매액,측정기대저물전화정황.결과 균체12～48 h지간생장최왕성,36 h가입저물전화솔최고,가입저물후72 h전화기본결속,전화산물지유인삼조감Rd,저물투료량지소가이체도20 mg/mL,극분자전화솔체80%이상,전화온도27 ℃～32 ℃지간최가.정식태세포、포외매이급조매액도가이장인삼조감Rb1전화위인삼조감Rd.결론 여문헌보도상비,Paecilomyces bainier sp229-7돌변주구유량호적저물내수성화전일성,쾌속생장적후기시저물투료적최가시궤,Rb1 전화위Rd 적시간축단위3 d,투료량지소증가20배,현저제고료전화효솔,가망응용우공업생산.돌변주적고전화효솔가능여전화매유세포내산생병부분분비도포외유관,증가료매여저물접촉궤회,피면료산물재포내과량적루.
Objective To investigate the mycelia growth of the mutant strain Paecilomyces bainier sp229-7 and it's biotransformation from ginsenoside Rb1 to Rd. Methods The substrate was biotransformed by the mutant in different conditions, and the products were analyzed by HPLC. Results The period of vigorous growth of the mutant was 12-48 h. The optimal transformation temperature range was from 27 ℃ to 32 ℃. The best time for adding substrate was 36 h after inoculation and the substrate (Rb1 20 mg/mL) was specifically transformed into ginsenoside Rd. The transformation process was terminated at 72 h. The ginsenoside Rb1 could be transformed to Rd by all of mycelia, crude enzymes and external enzymes. Conclusions Compared with the reference, the mutant of Paecilomyces bainier sp229-7 growth is quicker and the transformation efficiency has been greatly improved. The reaction time can be shortened to 3 days, and the amount of substrate increased at least 20 times.
