解剖学报
解剖學報
해부학보
ACTA ANATOMICA SINICA
2011年
5期
600-604
,共5页
田美玲%谭雪锋%金国华%秦建兵%李浩明%朱蕙霞%张蕾
田美玲%譚雪鋒%金國華%秦建兵%李浩明%硃蕙霞%張蕾
전미령%담설봉%금국화%진건병%리호명%주혜하%장뢰
核受体相关因子1%神经干细胞%帕金森病%基因转染%移植%免疫荧光%大鼠
覈受體相關因子1%神經榦細胞%帕金森病%基因轉染%移植%免疫熒光%大鼠
핵수체상관인자1%신경간세포%파금삼병%기인전염%이식%면역형광%대서
目的 探讨转染核受体相关因子1(Nurr1)基因的神经干细胞(NSCs)移植至帕金森病(PD)大鼠纹状体后向多巴胺能神经元的分化及对PD大鼠行为的影响.方法 应用脑立体定位技术构建单侧PD大鼠模型.将PD大鼠随机分为3组,每组8只.假手术组注射生理盐水,NSCs组移植未转染的NSCs,Nurr1组先将重组质粒载体pEGFP-N1-Nurr1转染NSCs,用RT-PCR方法及免疫荧光染色检测Nurr1基因的表达效果,然后用转染Nurr1 基因的NSCs进行移植.细胞用DIL标记后移植至PD大鼠右侧纹状体中,术后2周起用阿朴吗啡诱发旋转试验观测移植后大鼠行为改善情况,12周后用免疫荧光技术检测移植细胞中酪氨酸羟化酶(TH)的表达.结果 重组质粒转染后Nurr1基因能在NSCs中过表达.移植后假手术组和NSCs组PD大鼠的旋转圈数均无下降趋势,两者差异无统计学意义(P＞0.05);NSCs组移植区可见DIL阳性细胞,但TH免疫阳性细胞较少,平均每视野为(3.21±0.40)个;Nurr1组移植后PD大鼠的旋转圈数从第6周开始下降,移植区DIL/TH双标神经元每视野达(9.28±1.09)个.结论 Nurr1基因过表达能诱导NSCs在PD大鼠纹状体内分化为TH阳性的多巴胺能神经元,并在一定程度上改善大鼠的行为功能.
目的 探討轉染覈受體相關因子1(Nurr1)基因的神經榦細胞(NSCs)移植至帕金森病(PD)大鼠紋狀體後嚮多巴胺能神經元的分化及對PD大鼠行為的影響.方法 應用腦立體定位技術構建單側PD大鼠模型.將PD大鼠隨機分為3組,每組8隻.假手術組註射生理鹽水,NSCs組移植未轉染的NSCs,Nurr1組先將重組質粒載體pEGFP-N1-Nurr1轉染NSCs,用RT-PCR方法及免疫熒光染色檢測Nurr1基因的錶達效果,然後用轉染Nurr1 基因的NSCs進行移植.細胞用DIL標記後移植至PD大鼠右側紋狀體中,術後2週起用阿樸嗎啡誘髮鏇轉試驗觀測移植後大鼠行為改善情況,12週後用免疫熒光技術檢測移植細胞中酪氨痠羥化酶(TH)的錶達.結果 重組質粒轉染後Nurr1基因能在NSCs中過錶達.移植後假手術組和NSCs組PD大鼠的鏇轉圈數均無下降趨勢,兩者差異無統計學意義(P＞0.05);NSCs組移植區可見DIL暘性細胞,但TH免疫暘性細胞較少,平均每視野為(3.21±0.40)箇;Nurr1組移植後PD大鼠的鏇轉圈數從第6週開始下降,移植區DIL/TH雙標神經元每視野達(9.28±1.09)箇.結論 Nurr1基因過錶達能誘導NSCs在PD大鼠紋狀體內分化為TH暘性的多巴胺能神經元,併在一定程度上改善大鼠的行為功能.
목적 탐토전염핵수체상관인자1(Nurr1)기인적신경간세포(NSCs)이식지파금삼병(PD)대서문상체후향다파알능신경원적분화급대PD대서행위적영향.방법 응용뇌입체정위기술구건단측PD대서모형.장PD대서수궤분위3조,매조8지.가수술조주사생리염수,NSCs조이식미전염적NSCs,Nurr1조선장중조질립재체pEGFP-N1-Nurr1전염NSCs,용RT-PCR방법급면역형광염색검측Nurr1기인적표체효과,연후용전염Nurr1 기인적NSCs진행이식.세포용DIL표기후이식지PD대서우측문상체중,술후2주기용아박마배유발선전시험관측이식후대서행위개선정황,12주후용면역형광기술검측이식세포중락안산간화매(TH)적표체.결과 중조질립전염후Nurr1기인능재NSCs중과표체.이식후가수술조화NSCs조PD대서적선전권수균무하강추세,량자차이무통계학의의(P＞0.05);NSCs조이식구가견DIL양성세포,단TH면역양성세포교소,평균매시야위(3.21±0.40)개;Nurr1조이식후PD대서적선전권수종제6주개시하강,이식구DIL/TH쌍표신경원매시야체(9.28±1.09)개.결론 Nurr1기인과표체능유도NSCs재PD대서문상체내분화위TH양성적다파알능신경원,병재일정정도상개선대서적행위공능.
