细胞与分子免疫学杂志
細胞與分子免疫學雜誌
세포여분자면역학잡지
2009年
12期
1143-1145
,共3页
申峻松%张辉%张成全%潘志明%殷月兰%焦新安
申峻鬆%張輝%張成全%潘誌明%慇月蘭%焦新安
신준송%장휘%장성전%반지명%은월란%초신안
结核分枝杆菌%CFP-10%单克隆抗体
結覈分枝桿菌%CFP-10%單剋隆抗體
결핵분지간균%CFP-10%단극륭항체
目的:制备抗结核分枝杆菌CFP-10蛋白的单克隆抗体(mAb).方法:应用淋巴细胞杂交瘤技术,以重组菌BL21(DE3)-pET-30a(+)-lhp原核表达的融合蛋白His-CFP-10作为抗原免疫BALB/c小鼠,以纯化的融合蛋白GST-CFP-10作为检测抗原,制备抗结核分枝杆菌CFP-10 mAb;采用间接ELISA、Dot-ELISA和Western blot鉴定mAb的特异性.结果:获得2株稳定分泌抗结核分枝杆菌CFP-10 mAb的杂交瘤细胞株6E8、2E7,其Ig亚类分别为IgG1、IgG2b.mAb 6E8、2E7腹水的ELISA效价分别为1:1 000 000,1:1 024 000.在Dot-ELISA试验中,这2株mAb均只与表达His-CFP-10及GST-CFP-10的重组大肠杆菌反应,与其他5种菌株均不发生反应.在Western blot试验中,2株mAb只与CFP-10蛋白发生反应,出现特异性条带.结果表明,mAb 6E8、2E7是针对结核分枝杆菌CFP-10的特异性mAb.结论:成功地制备抗结核分枝杆菌CFP-10的mAb,它们在结核分枝杆菌诊断和致病机理研究等方面有重要应用价值.
目的:製備抗結覈分枝桿菌CFP-10蛋白的單剋隆抗體(mAb).方法:應用淋巴細胞雜交瘤技術,以重組菌BL21(DE3)-pET-30a(+)-lhp原覈錶達的融閤蛋白His-CFP-10作為抗原免疫BALB/c小鼠,以純化的融閤蛋白GST-CFP-10作為檢測抗原,製備抗結覈分枝桿菌CFP-10 mAb;採用間接ELISA、Dot-ELISA和Western blot鑒定mAb的特異性.結果:穫得2株穩定分泌抗結覈分枝桿菌CFP-10 mAb的雜交瘤細胞株6E8、2E7,其Ig亞類分彆為IgG1、IgG2b.mAb 6E8、2E7腹水的ELISA效價分彆為1:1 000 000,1:1 024 000.在Dot-ELISA試驗中,這2株mAb均隻與錶達His-CFP-10及GST-CFP-10的重組大腸桿菌反應,與其他5種菌株均不髮生反應.在Western blot試驗中,2株mAb隻與CFP-10蛋白髮生反應,齣現特異性條帶.結果錶明,mAb 6E8、2E7是針對結覈分枝桿菌CFP-10的特異性mAb.結論:成功地製備抗結覈分枝桿菌CFP-10的mAb,它們在結覈分枝桿菌診斷和緻病機理研究等方麵有重要應用價值.
목적:제비항결핵분지간균CFP-10단백적단극륭항체(mAb).방법:응용림파세포잡교류기술,이중조균BL21(DE3)-pET-30a(+)-lhp원핵표체적융합단백His-CFP-10작위항원면역BALB/c소서,이순화적융합단백GST-CFP-10작위검측항원,제비항결핵분지간균CFP-10 mAb;채용간접ELISA、Dot-ELISA화Western blot감정mAb적특이성.결과:획득2주은정분비항결핵분지간균CFP-10 mAb적잡교류세포주6E8、2E7,기Ig아류분별위IgG1、IgG2b.mAb 6E8、2E7복수적ELISA효개분별위1:1 000 000,1:1 024 000.재Dot-ELISA시험중,저2주mAb균지여표체His-CFP-10급GST-CFP-10적중조대장간균반응,여기타5충균주균불발생반응.재Western blot시험중,2주mAb지여CFP-10단백발생반응,출현특이성조대.결과표명,mAb 6E8、2E7시침대결핵분지간균CFP-10적특이성mAb.결론:성공지제비항결핵분지간균CFP-10적mAb,타문재결핵분지간균진단화치병궤리연구등방면유중요응용개치.
