中国农学通报
中國農學通報
중국농학통보
CHINESE AGRICULTURAL SCIENCE BULLETIN
2012年
3期
240-244
,共5页
牛伯庆%汪文静%宋洪英%谢响明
牛伯慶%汪文靜%宋洪英%謝響明
우백경%왕문정%송홍영%사향명
脂滴包被蛋白%农杆菌介导的转化%转基因烟草%核盘菌%抗性
脂滴包被蛋白%農桿菌介導的轉化%轉基因煙草%覈盤菌%抗性
지적포피단백%농간균개도적전화%전기인연초%핵반균%항성
为开发新的抗菌核病基因,针对抗病相关的脂滴包被蛋白基因8-3,设计了分别带有酶切位点Xba Ⅰ和BamHⅠ的1对引物,从克隆载体pMD19-T-8-3中扩增到基因8-3,双酶切8-3并连接到植物表达载体pBI 121上;将重组质粒导入根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens) LBA4404中,通过其介导将8-3基因转化到烟草中;获得了35株抗性转化株,PCR及测序分析鉴定阳性植株为21株,RT-PCR检测到基因8-3在其中能够表达;通过接种核盘菌和草酸处理试验,表明8-3基因可使烟草提高了草酸耐受水平,从而对菌核病具备一定的抗性.本实验研究了潜在功能基因8-3的抗病性,为植物抗菌核病的研究奠定了基础.
為開髮新的抗菌覈病基因,針對抗病相關的脂滴包被蛋白基因8-3,設計瞭分彆帶有酶切位點Xba Ⅰ和BamHⅠ的1對引物,從剋隆載體pMD19-T-8-3中擴增到基因8-3,雙酶切8-3併連接到植物錶達載體pBI 121上;將重組質粒導入根癌農桿菌(Agrobacterium tumefaciens) LBA4404中,通過其介導將8-3基因轉化到煙草中;穫得瞭35株抗性轉化株,PCR及測序分析鑒定暘性植株為21株,RT-PCR檢測到基因8-3在其中能夠錶達;通過接種覈盤菌和草痠處理試驗,錶明8-3基因可使煙草提高瞭草痠耐受水平,從而對菌覈病具備一定的抗性.本實驗研究瞭潛在功能基因8-3的抗病性,為植物抗菌覈病的研究奠定瞭基礎.
위개발신적항균핵병기인,침대항병상관적지적포피단백기인8-3,설계료분별대유매절위점Xba Ⅰ화BamHⅠ적1대인물,종극륭재체pMD19-T-8-3중확증도기인8-3,쌍매절8-3병련접도식물표체재체pBI 121상;장중조질립도입근암농간균(Agrobacterium tumefaciens) LBA4404중,통과기개도장8-3기인전화도연초중;획득료35주항성전화주,PCR급측서분석감정양성식주위21주,RT-PCR검측도기인8-3재기중능구표체;통과접충핵반균화초산처리시험,표명8-3기인가사연초제고료초산내수수평,종이대균핵병구비일정적항성.본실험연구료잠재공능기인8-3적항병성,위식물항균핵병적연구전정료기출.