西北农业学报
西北農業學報
서북농업학보
ACTA AGRICULTURAE BOREALI-OCCIDENTALIS SINICA
2012年
2期
99-102,110
,共5页
淡色库蚊%抗药性%总RNA提取%定量分析
淡色庫蚊%抗藥性%總RNA提取%定量分析
담색고문%항약성%총RNA제취%정량분석
采用异硫氰酸胍法、Trizol法、Trizol改良法、CTAB法及Trizol+ CTAB 5种方法提取的淡色库蚊总RNA,以期得到最优方法.提取总RNA并用电泳及紫外分光光度计检测,经过Dnase I消化后反转录成cDNA,以此为模板,用CYP6F1引物作定量表达分析.结果表明,与其他几种方法相比,CTAB法提取的效果最好,提取的样品纯度高,完整性好,杂质较少,DNA残留少,降解不明显.CTAB法提取的RNA可以作为eDNA合成和基因克隆的模板,能够满足后续研究的需要.
採用異硫氰痠胍法、Trizol法、Trizol改良法、CTAB法及Trizol+ CTAB 5種方法提取的淡色庫蚊總RNA,以期得到最優方法.提取總RNA併用電泳及紫外分光光度計檢測,經過Dnase I消化後反轉錄成cDNA,以此為模闆,用CYP6F1引物作定量錶達分析.結果錶明,與其他幾種方法相比,CTAB法提取的效果最好,提取的樣品純度高,完整性好,雜質較少,DNA殘留少,降解不明顯.CTAB法提取的RNA可以作為eDNA閤成和基因剋隆的模闆,能夠滿足後續研究的需要.
채용이류청산고법、Trizol법、Trizol개량법、CTAB법급Trizol+ CTAB 5충방법제취적담색고문총RNA,이기득도최우방법.제취총RNA병용전영급자외분광광도계검측,경과Dnase I소화후반전록성cDNA,이차위모판,용CYP6F1인물작정량표체분석.결과표명,여기타궤충방법상비,CTAB법제취적효과최호,제취적양품순도고,완정성호,잡질교소,DNA잔류소,강해불명현.CTAB법제취적RNA가이작위eDNA합성화기인극륭적모판,능구만족후속연구적수요.