第四军医大学学报
第四軍醫大學學報
제사군의대학학보
JOURNAL OF THE FOURTH MILITARY MEDICAL UNIVERSITY
2004年
16期
1470-1473
,共4页
宋立强%戚好文%李妍%王吉村%林爱华
宋立彊%慼好文%李妍%王吉村%林愛華
송립강%척호문%리연%왕길촌%림애화
哮喘%气道%上皮细胞%杯状细胞%氯化物通道
哮喘%氣道%上皮細胞%杯狀細胞%氯化物通道
효천%기도%상피세포%배상세포%록화물통도
目的: 探讨人激活Cl-通道I型(hCLCA1)在气道杯状细胞合成黏蛋白中的调控作用. 方法: 以人气道黏液上皮细胞系NCI-H292作为杯状细胞特性研究的体外模型,构建携带荧光蛋白标签的真核表达质粒pIRES2-EFGP/hCLCA1,转染NCI-H292细胞,用G418筛选稳定表达hCLCA1的细胞NCI-H292/hCLCA1. 对被转染细胞采用荧光显微镜和RT-PCR法检测hCLCA1 mRNA. 根据NFA(hCLCA1阻断剂)干预与否,将细胞分为4组: ① NCI-H292;② NCI-H292/hCLCA1;③ NCI-H292+NFA;④ NCI-H292/hCLCA1+NFA. MTT法检测各组细胞的增殖活性;PAS特染法检测各组细胞黏液糖蛋白的表达状况, RT-PCR法检测黏蛋白MUC5AC mRNA水平. 结果: 经过500g/L的G418筛选,证实获得NCI-H292/hCLCA1细胞. 对各组细胞检测结果表明,NCI-H292/hCLCA1细胞的增殖活性、黏液糖蛋白表达量及MUC5AC mRNA水平均显著高于亲本细胞,并且NFA能有效抑制NCI-H292/hCLCA1的这些生物活性改变. 结论: hCLCA1能有效促进气道杯状细胞的增殖能力及黏蛋白合成,早期阻断hCLCA1可能是哮喘防治的有效途径之一.
目的: 探討人激活Cl-通道I型(hCLCA1)在氣道杯狀細胞閤成黏蛋白中的調控作用. 方法: 以人氣道黏液上皮細胞繫NCI-H292作為杯狀細胞特性研究的體外模型,構建攜帶熒光蛋白標籤的真覈錶達質粒pIRES2-EFGP/hCLCA1,轉染NCI-H292細胞,用G418篩選穩定錶達hCLCA1的細胞NCI-H292/hCLCA1. 對被轉染細胞採用熒光顯微鏡和RT-PCR法檢測hCLCA1 mRNA. 根據NFA(hCLCA1阻斷劑)榦預與否,將細胞分為4組: ① NCI-H292;② NCI-H292/hCLCA1;③ NCI-H292+NFA;④ NCI-H292/hCLCA1+NFA. MTT法檢測各組細胞的增殖活性;PAS特染法檢測各組細胞黏液糖蛋白的錶達狀況, RT-PCR法檢測黏蛋白MUC5AC mRNA水平. 結果: 經過500g/L的G418篩選,證實穫得NCI-H292/hCLCA1細胞. 對各組細胞檢測結果錶明,NCI-H292/hCLCA1細胞的增殖活性、黏液糖蛋白錶達量及MUC5AC mRNA水平均顯著高于親本細胞,併且NFA能有效抑製NCI-H292/hCLCA1的這些生物活性改變. 結論: hCLCA1能有效促進氣道杯狀細胞的增殖能力及黏蛋白閤成,早期阻斷hCLCA1可能是哮喘防治的有效途徑之一.
목적: 탐토인격활Cl-통도I형(hCLCA1)재기도배상세포합성점단백중적조공작용. 방법: 이인기도점액상피세포계NCI-H292작위배상세포특성연구적체외모형,구건휴대형광단백표첨적진핵표체질립pIRES2-EFGP/hCLCA1,전염NCI-H292세포,용G418사선은정표체hCLCA1적세포NCI-H292/hCLCA1. 대피전염세포채용형광현미경화RT-PCR법검측hCLCA1 mRNA. 근거NFA(hCLCA1조단제)간예여부,장세포분위4조: ① NCI-H292;② NCI-H292/hCLCA1;③ NCI-H292+NFA;④ NCI-H292/hCLCA1+NFA. MTT법검측각조세포적증식활성;PAS특염법검측각조세포점액당단백적표체상황, RT-PCR법검측점단백MUC5AC mRNA수평. 결과: 경과500g/L적G418사선,증실획득NCI-H292/hCLCA1세포. 대각조세포검측결과표명,NCI-H292/hCLCA1세포적증식활성、점액당단백표체량급MUC5AC mRNA수평균현저고우친본세포,병차NFA능유효억제NCI-H292/hCLCA1적저사생물활성개변. 결론: hCLCA1능유효촉진기도배상세포적증식능력급점단백합성,조기조단hCLCA1가능시효천방치적유효도경지일.
