CAJ | 학술논문

①目的探讨脑源性神经营养因子基因(BDNF mRNA)修饰神经干细胞(NSCs)移植到大鼠脑缺血损伤处后的基因表达变化.②方法64只成年SD大鼠随机分为4组,正常对照组(A组)、手术对照组(B组)、NSCs移植组(C组)、BDNF基因修饰NSCs移植组(D组),每组16只.应用线栓法建立大鼠大脑中动脉闭塞(MCAO)再灌注模型.C、D组分别将制备好的NSCs和BDNF基因修饰NSCs细胞悬液10 μL(约6×104个细胞)用微量注射器注入损伤处,缝合皮肤.各组分别于手术后7、14、21、30 d将4只大鼠麻醉,取脑,制备组织切片,应用X-gal组化、原位杂交等方法,检测移植处细胞的标记基因表达和BDNF的表达.③结果X-gal组化染色结果显示,移植的NSCs和BDNF基因修饰NSCs均能在脑缺血区内存活,并分化成各种细胞,D组X-gal阳性细胞比C组多,且在移植7、14 d时细胞形态清晰,大部分为密集团状生长.原位杂交显示,手术后各组各时间点脑组织切片上均可见BDNF mRNA阳性细胞表达,其中D组的阳性细胞数目明显高于C组.图像分析结果显示,C组BDNFmRNA阳性细胞的平均吸光度值在移植后7～14 d时最高,以后呈逐渐下降趋势,至21 d时与B组相比差异均有显著性(F=6.27～14.35,q=4.96～7.85,P＜0.01),到30 d时与B组差异无显著意义.C组与D组比较,各时间点BDNF mRNA阳性细胞的平均吸光度值差异均有显著意义(q=5.17～9.28,P＜0.01).④结论BDFN基因修饰NSCs能在脑损伤移植处存活,强烈表达BDNF mRNA.BDNF mRNA修饰NSCs可以作为脑缺血损伤修复的移植材料.
①목적탐토뇌원성신경영양인자기인(BDNF mRNA)수식신경간세포(NSCs)이식도대서뇌결혈손상처후적기인표체변화.②방법64지성년SD대서수궤분위4조,정상대조조(A조)、수술대조조(B조)、NSCs이식조(C조)、BDNF기인수식NSCs이식조(D조),매조16지.응용선전법건립대서대뇌중동맥폐새(MCAO)재관주모형.C、D조분별장제비호적NSCs화BDNF기인수식NSCs세포현액10 μL(약6×104개세포)용미량주사기주입손상처,봉합피부.각조분별우수술후7、14、21、30 d장4지대서마취,취뇌,제비조직절편,응용X-gal조화、원위잡교등방법,검측이식처세포적표기기인표체화BDNF적표체.③결과X-gal조화염색결과현시,이식적NSCs화BDNF기인수식NSCs균능재뇌결혈구내존활,병분화성각충세포,D조X-gal양성세포비C조다,차재이식7、14 d시세포형태청석,대부분위밀집단상생장.원위잡교현시,수술후각조각시간점뇌조직절편상균가견BDNF mRNA양성세포표체,기중D조적양성세포수목명현고우C조.도상분석결과현시,C조BDNFmRNA양성세포적평균흡광도치재이식후7～14 d시최고,이후정축점하강추세,지21 d시여B조상비차이균유현저성(F=6.27～14.35,q=4.96～7.85,P＜0.01),도30 d시여B조차이무현저의의.C조여D조비교,각시간점BDNF mRNA양성세포적평균흡광도치차이균유현저의의(q=5.17～9.28,P＜0.01).④결론BDFN기인수식NSCs능재뇌손상이식처존활,강렬표체BDNF mRNA.BDNF mRNA수식NSCs가이작위뇌결혈손상수복적이식재료.