广西农业生物科学
廣西農業生物科學
엄서농업생물과학
JOURNAL OF GUANGXI AGRICULTURAL AND BIOLOGICAL SCIENCE
2007年
z1期
1-6
,共6页
蓝秀万%陈美佳%周燕%段丹华%陈保善
藍秀萬%陳美佳%週燕%段丹華%陳保善
람수만%진미가%주연%단단화%진보선
板栗疫病菌%同源重组%同源双交换%同源单交换
闆慄疫病菌%同源重組%同源雙交換%同源單交換
판률역병균%동원중조%동원쌍교환%동원단교환
低毒病毒/板栗疫病菌系统是一个具有独特优点的、崭新的研究病毒与宿主相互作用的模型系统.以同源重组为基础的基因打靶是研究基因功能和病毒与宿主相互作用分子机制的重要手段.为了研究在板栗疫病菌同源重组遗传操作中同源片段大小对同源重组频率的影响,利用一段5.4 kb板栗疫病菌染色体DNA序列,构建了以潮霉素抗性基因为遗传转化筛选标记的3个同源双交换片段以及3个同源单交换质粒,分别转化板栗疫病菌EP155原生质体,检测筛选同源重组转化子并计算发生同源重组频率.结果表明,在板栗疫病菌中3个同源双交换片段FHA1 (1.7～2.0 kb)、FHA2 (1.0～1.2 kb)和FHA3 (0.5 kb)的同源重组频率分别为3.73% 、2.06%和0;3个同源单交换质粒pFH1 (1.76 kb)、pFH2 (1.23 kb)和pFH3(0.54 kb)的同源重组频率分别为0.95% 、0和0.这些结果为板栗疫病菌同源重组遗传操作中同源片段大小的设计提供了依据.
低毒病毒/闆慄疫病菌繫統是一箇具有獨特優點的、嶄新的研究病毒與宿主相互作用的模型繫統.以同源重組為基礎的基因打靶是研究基因功能和病毒與宿主相互作用分子機製的重要手段.為瞭研究在闆慄疫病菌同源重組遺傳操作中同源片段大小對同源重組頻率的影響,利用一段5.4 kb闆慄疫病菌染色體DNA序列,構建瞭以潮黴素抗性基因為遺傳轉化篩選標記的3箇同源雙交換片段以及3箇同源單交換質粒,分彆轉化闆慄疫病菌EP155原生質體,檢測篩選同源重組轉化子併計算髮生同源重組頻率.結果錶明,在闆慄疫病菌中3箇同源雙交換片段FHA1 (1.7～2.0 kb)、FHA2 (1.0～1.2 kb)和FHA3 (0.5 kb)的同源重組頻率分彆為3.73% 、2.06%和0;3箇同源單交換質粒pFH1 (1.76 kb)、pFH2 (1.23 kb)和pFH3(0.54 kb)的同源重組頻率分彆為0.95% 、0和0.這些結果為闆慄疫病菌同源重組遺傳操作中同源片段大小的設計提供瞭依據.
저독병독/판률역병균계통시일개구유독특우점적、참신적연구병독여숙주상호작용적모형계통.이동원중조위기출적기인타파시연구기인공능화병독여숙주상호작용분자궤제적중요수단.위료연구재판률역병균동원중조유전조작중동원편단대소대동원중조빈솔적영향,이용일단5.4 kb판률역병균염색체DNA서렬,구건료이조매소항성기인위유전전화사선표기적3개동원쌍교환편단이급3개동원단교환질립,분별전화판률역병균EP155원생질체,검측사선동원중조전화자병계산발생동원중조빈솔.결과표명,재판률역병균중3개동원쌍교환편단FHA1 (1.7～2.0 kb)、FHA2 (1.0～1.2 kb)화FHA3 (0.5 kb)적동원중조빈솔분별위3.73% 、2.06%화0;3개동원단교환질립pFH1 (1.76 kb)、pFH2 (1.23 kb)화pFH3(0.54 kb)적동원중조빈솔분별위0.95% 、0화0.저사결과위판률역병균동원중조유전조작중동원편단대소적설계제공료의거.
