实用医学杂志
實用醫學雜誌
실용의학잡지
THE JOURNAL OF PRACTICAL MEDICINE
2008年
5期
700-703
,共4页
王玮%孙秉中%刘庆春%药立波
王瑋%孫秉中%劉慶春%藥立波
왕위%손병중%류경춘%약립파
白血病%淋巴细胞%慢性%基因%p16%K562细胞%伊马替尼%基因克隆
白血病%淋巴細胞%慢性%基因%p16%K562細胞%伊馬替尼%基因剋隆
백혈병%림파세포%만성%기인%p16%K562세포%이마체니%기인극륭
目的:探讨p16基因克隆联合伊马替尼对慢性粒细胞白血病细胞株K562细胞的增殖、周期及凋亡等的调控作用.方法:RT-PCR扩增p16基因,胶纯化回收后连接到T载体测序,序列正确后构建p16-pcDNA3.1载体,将p16-pcDNA3.1与空载体分别以脂质体转染入p16基因缺失的K562细胞,经筛选得到G418抗性的K562细胞株,Western blot证实转染后有p16蛋白表达,MTT法检测细胞存活率,流式细胞仪检测细胞周期和凋亡.结果:反复测序发现,从K562细胞中扩增的DNA片段属于非特异性扩增,证实K562细胞中p16基因缺失.转染p16基因后表达外源性p16蛋白的p16-pcDNA3.1-K562细胞株生长速度明显减慢;伊马替尼作用于已转染p16-pcDNA3.1的K562细胞,其细胞存活率与伊马替尼作用未转染K562细胞及单纯转染p16-pcDNA3.1的K562细胞相比均明显降低.转染p16基因后GO/G1期细胞增多,S期细胞明显减少,p16-peDNA3.1-K562细胞与伊马替尼联合应用后凋亡细胞比例明显上升.结论:p16基因抑制K562细胞增殖并调节其周期.外源p16联合应用伊马替尼对抑制K562细胞增殖及促凋亡方面具有协同作用.
目的:探討p16基因剋隆聯閤伊馬替尼對慢性粒細胞白血病細胞株K562細胞的增殖、週期及凋亡等的調控作用.方法:RT-PCR擴增p16基因,膠純化迴收後連接到T載體測序,序列正確後構建p16-pcDNA3.1載體,將p16-pcDNA3.1與空載體分彆以脂質體轉染入p16基因缺失的K562細胞,經篩選得到G418抗性的K562細胞株,Western blot證實轉染後有p16蛋白錶達,MTT法檢測細胞存活率,流式細胞儀檢測細胞週期和凋亡.結果:反複測序髮現,從K562細胞中擴增的DNA片段屬于非特異性擴增,證實K562細胞中p16基因缺失.轉染p16基因後錶達外源性p16蛋白的p16-pcDNA3.1-K562細胞株生長速度明顯減慢;伊馬替尼作用于已轉染p16-pcDNA3.1的K562細胞,其細胞存活率與伊馬替尼作用未轉染K562細胞及單純轉染p16-pcDNA3.1的K562細胞相比均明顯降低.轉染p16基因後GO/G1期細胞增多,S期細胞明顯減少,p16-peDNA3.1-K562細胞與伊馬替尼聯閤應用後凋亡細胞比例明顯上升.結論:p16基因抑製K562細胞增殖併調節其週期.外源p16聯閤應用伊馬替尼對抑製K562細胞增殖及促凋亡方麵具有協同作用.
목적:탐토p16기인극륭연합이마체니대만성립세포백혈병세포주K562세포적증식、주기급조망등적조공작용.방법:RT-PCR확증p16기인,효순화회수후련접도T재체측서,서렬정학후구건p16-pcDNA3.1재체,장p16-pcDNA3.1여공재체분별이지질체전염입p16기인결실적K562세포,경사선득도G418항성적K562세포주,Western blot증실전염후유p16단백표체,MTT법검측세포존활솔,류식세포의검측세포주기화조망.결과:반복측서발현,종K562세포중확증적DNA편단속우비특이성확증,증실K562세포중p16기인결실.전염p16기인후표체외원성p16단백적p16-pcDNA3.1-K562세포주생장속도명현감만;이마체니작용우이전염p16-pcDNA3.1적K562세포,기세포존활솔여이마체니작용미전염K562세포급단순전염p16-pcDNA3.1적K562세포상비균명현강저.전염p16기인후GO/G1기세포증다,S기세포명현감소,p16-peDNA3.1-K562세포여이마체니연합응용후조망세포비례명현상승.결론:p16기인억제K562세포증식병조절기주기.외원p16연합응용이마체니대억제K562세포증식급촉조망방면구유협동작용.
